[发明专利]一种零背景的平末端克隆载体pUB857及其构建方法和应用在审
申请号: | 201610709625.4 | 申请日: | 2016-08-23 |
公开(公告)号: | CN107760703A | 公开(公告)日: | 2018-03-06 |
发明(设计)人: | 汪洋;张开;易军;苏会娟 | 申请(专利权)人: | 南京理工大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/66 |
代理公司: | 南京理工大学专利中心32203 | 代理人: | 刘海霞,朱显国 |
地址: | 210094 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 背景 末端 克隆 载体 pub857 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种零背景的平末端克隆载体pUB857,其特征在于,为利用PvuII酶切pUC19质粒形成线性DNA链,同时在酶切位点连接ccdB和cI857-PR形成的全长序列为SEQ IDNO.9的克隆载体,所述的ccdB开放阅读框上设计有SmaI酶切位点。
2.如权利要求1所述的零背景的平末端克隆载体pUB857的构建方法,其特征在于,通过合成引物PCR扩增cI857-PR目的片段和ccdB目的片段,并将pUC19质粒DNA用限制性内切酶PvuII进行酶切,回收线性化片段pUC19,最后将ccdB、cI857-PR、线性化pUC19片段进行连接,得到克隆载体pUB857。
3.如权利要求1所述的零背景的平末端克隆载体pUB857在基因克隆中的应用。
4.如权利要求1所述的零背景的平末端克隆载体pUB857在基因文库构建中的应用。
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