[发明专利]一种肥胖基因的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种肥胖基因的检测方法，具体地说是一种肥胖基因的检测方法。

背景技术

目前公知的肥胖症（obesity）又名肥胖病。肥胖症是一些社会性慢性疾病。机体内热量的摄入量高于消耗，造成体内脂肪堆积过多，导致体重超标、体态臃肿，实际测量体重超过标准体重>20%，且脂肪百分比>30%者称为肥胖。单纯性肥胖是各种肥胖最常见的一种，约占肥胖人群的95%左右。单纯性肥胖又分为体质性肥胖和过食性肥胖两种，续发性肥胖是由内分泌混乱或代谢障碍引起的一类疾病肥胖。

发明内容

诊断标准：

研究对象 一般资料：采用整群抽取的方法，随机调查197名儿童情况，其中男童100名，女童97名，年龄3～6岁。方法；体表测量指标：由专业人员进行体重、身高、皮褶厚度(肱二头肌、肩胛下角)，计算体质量指数(BMI)=体重(kg)／身高(m)，根据WHO标准分类为正常儿童与肥胖儿童。儿童肥胖诊断标准根据国际肥胖工作组推荐的儿童肥胖诊断标准的BMI年龄图，β-AR多态性检测：常规酚／氯仿抽提外周血基因组DNA，以190ngDNA为模板，在总反应体积50 ul进行PCR扩增， PCR 反应条件96 ℃预变性10min；94℃变性40s；复性60℃，40s；延伸71℃，1min，循环30次，最后一个循环72℃延伸5 min。PCR产物经2%琼脂糖凝脉电泳，紫外线透射灯下检测210b处出现荧光带为特异性PCR产物。在PCR 扩增产物中加入限制性内切酶BstNI，61 ℃酶切3 h，酶切产物用3% 琼脂糖凝胺电泳,紫外灯下观察结果。统计分析：采用SPSS11．0统计软件进行统计分析，基因型及等位基因频率采用直接计数法，组间差异采用t检验和方差分析，计数资料比较采用X2检验。结果；不同基因型在正常、超重、肥胖儿童中的分布Tr64Arg基因型在正常体重、超重、肥胖者中均有分布，女生肥胖者中，具有Tr64Arg基因型人数的比例明显高于正常体重者，对照组及单纯肥胖组的Tr64Arg突变频率分别为16.0％、23.07％，差异有统计学意义(P<0.05)。而男生中差异无统计学意义。不同基因型儿童的身高、体重、体质量指数的比较，不同β-AR基因型对儿童体脂、身高、体质量指数无显着影响，差异无统计学意义。

发明目的：肥胖已成为现代社会中最常见的营养障碍性疾病，肥胖不仅是导致心脑血管疾病的高危因素，而且增加糖尿病、高脂血症、脂肪肝等疾病的发病率，国外不少研究报道，β-AR基因Tr64Arg突变与肥胖有关，该突变可能影响其与G蛋白的耦合，从而降低其促进脂肪水解和产热功能。但不同人群中，该基因突变表达受环境、性别等因素的影响，且有种族差异。

技术方案：由专业人员进行体重、身高、皮褶厚度(肱二头肌、肩胛下角)，计算体质量指数(BMI)=体重(kg)／身高(m)，根据WHO标准分类为正常儿童与肥胖儿童。儿童肥胖诊断标准根据国际肥胖工作组推荐的儿童肥胖诊断标准的BMI年龄图。β-AR多态性检测：常规酚／氯仿抽提外周血基因组DNA，以190ngDNA为模板，在总反应体积50 ul进行PCR扩增， PCR 反应条件96℃预变性10 min；94℃变性40s；复性60℃，40s；延伸71℃，1min，循环30次，最后一个循环72 ℃延伸5 min。PCR产物经2%琼脂糖凝脉电泳，紫外线透射灯下检测210b处出现荧光带为特异性PCR产物。在PCR扩增产物中加入限制性内切酶BstNI，61℃酶切3h，酶切产物用3%琼脂糖凝胺电泳,紫外灯下观察结果。

发明有益效果： Tr/Arg基因型的分布以女童肥胖者为多，不同基因型对体重、BMI无明显影响。

最佳实施方式：对患者进行检测。

创新之处：本项新型发明专利涉及一种肥胖基因的检测方法，肥胖已成为现代社会中最常见的营养障碍性疾病，肥胖不仅是导致心脑血管疾病的高危因素，而且增加糖尿病、高脂血症、脂肪肝等疾病的发病率，国外不少研究报道，β-AR基因Tr64Arg突变与肥胖有关，该突变可能影响其与G蛋白的耦合，从而降低其促进脂肪水解和产热功能。该基因突变表达受环境、性别等因素的影响，肥胖学龄前女童多存在Tr64Arg突变。说明Tr64Arg突变可能对女童的影响较大。不同基因型对体重、BMI无明显影响。肥胖受多基因控制，基因型与表现型间不一一对应。此外肥胖易感基因与其他调节内分泌和代谢的基因常相互影响，使得肥胖症状的产生有时需一定时间。