[发明专利]一株乳酸乳球菌

说明书

本发明公开了一株乳酸乳球菌，属于食品生物技术领域。本发明分离得到的菌株命名为乳酸乳球菌WH103(Lactococcus lactis WH103)，其具有较好的酸耐受性，在食品、发酵等领域具有巨大的应用价值。虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

技术领域

本发明涉及一株乳酸乳球菌，属于食品生物技术领域。

背景技术

作为工业化的微生物细胞工厂，乳酸乳球菌已广泛应用于食品，发酵等领域。在开展上述领域中所需工业产品的发酵法生产过程中，产酸特性成为微生物必不可少的组成部分。一方面代谢产酸可帮助促进细胞能量转化、维持细胞内外渗透压平衡、增强本体细胞的环境竞争性。另一方面，随着胞内产酸的积累，导致微生物菌体细胞内的pH持续下降，胞内维持细胞正常生理功能的相关酶类活性受到抑制，进而影响细胞的代谢活性及其生产效率，并为生产成本、下游加工及后续工业排放物环境治理埋下诸多隐患。同时，作为益生菌中的一种，在人体胃肠道中也会遭受酸胁迫、胆盐胁迫等环境胁迫。因此，提高微生物菌株的酸胁迫耐受性，成为学术界和产业界亟待解决的重要问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一株乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)WH103，于2016年4月29日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M2016235，保藏地址为中国武汉武汉大学。

所述的乳酸乳球菌WH103是以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis NZ9000)为出发菌株，通过紫外诱变得到，在pH 4.5的条件下，OD₆₀₀值达到0.431，相比较诱变前提高了3.3倍；在pH4.0的乳酸中胁迫2h，存活率为5.64％，存活率是同等处理条件下诱变前菌株的5.7倍。

本发明选育得到的乳酸乳球菌WH103(CCTCC NO:M 2016235)在较低pH条件下，突变菌株WH103能够更好地生长，而出发菌株不能在较低pH条件下生长，突变菌株WH103具有更好的生长性能和酸耐受性。本发明提供的选育方法，操作简单易行，且效果较明显。

生物材料保藏

一株乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)WH103，于2016年4月29日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:M 2016235，保藏地址为中国武汉武汉大学。

具体实施方式

GM17培养基为：葡萄糖5.0g.L^-1,胰蛋白胨5.0g.L^-1，大豆蛋白胨5.0g.L^-1，牛肉浸膏5.0g.L^-1，酵母提取物2.5g.L^-1，维生素C 0.5g.L^-1，硫酸镁0.25g.L^-1，甘油磷酸二钠19.0g.L^-1。

pH 5.0的GM17培养基为25％的乳酸调节的pH值为5.0的GM17培养基。其他pH的GM17培养基以同样方法得到。

实施例1乳酸乳球菌(CCTCC NO:M 2016235)的选育方法

以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis NZ9000)为出发菌株，将其在GM17培养基中培养至对数生长期，调整菌液浓度1*10⁷个/CFU，取样离心(5000rpm；10min)后去上清，用0.85％的生理盐水洗涤重悬，重复两次。加入相同的生理盐水等体积重悬，然后在紫外诱变箱中进行诱变处理40s后离心加入等体积GM17培养基重悬后在30℃下静置培养1.5h。