[发明专利]防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌BA-7的发酵方法

说明书

本发明提供了防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌BA‑7的发酵方法，其包括步骤：（1）将萎缩芽孢杆菌BA‑7在固体培养基培养之后，挑取单菌落，置于液体培养基中，于30‑32℃震荡培养10‑12小时，转速为200‑220 rpm，作为种子液；（2）接种后，发酵24‑48小时，罐温为28‑32℃，发酵罐搅拌速度为220‑250rpm；发酵罐中的培养基的成分按质量百分数计包括：豆粉4‑5%、蛋白胨0.1‑0.15%、葡萄糖0.5‑0.7%、淀粉2‑3%、硫酸锰0.1%、硫酸亚铁0.06%、磷酸氢二钾0.2%、碳酸钙0.1%、消泡剂0.01%、余量为水，pH=7.0‑7.4；所述萎缩芽孢杆菌的分类命名为Bacillus atrophaeus BA‑7，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：M 2015765。

技术领域

本发明属于生物农药技术领域，具体涉及防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌BA-7的发酵方法。

背景技术

现有技术中，用于防治十字花科作物根肿病的生防菌株很少，主要集中在枯草芽孢杆菌(如枯草芽孢杆菌XF-1和枯草芽孢杆菌M3)和解淀粉芽孢杆菌(如解淀粉芽孢杆菌Bam22)，极大的限制了生防菌株在防治十字花科作物根肿病方面实际应用。重要的是，对于是否存在其它相应的生防菌种，研究者们还在努力的探索中。

本发明的发明人经过长时间的实验摸索工作，成功分离出了一株对十字花科作物(特别是油菜)具有十分优秀防治效果的萎缩芽孢杆菌BA-7。对其进行发酵方法的摸索，便于更好的对其进行实际应用。

发明内容

针对现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种防治十字花科作物根肿病的萎缩芽孢杆菌BA-7的发酵方法，该发酵方法包括如下步骤：

(1)将萎缩芽孢杆菌BA-7在固体培养基培养之后，挑取单菌落，置于液体培养基中，于30-32℃震荡培养10-12小时，转速为200-220rpm，作为种子液；所述液体培养基的成分按质量百分数计包括：酵母提取物0.1-0.4％、牛肉浸膏0.1-0.3％、蛋白胨0.6-1.0％、NaCl 0.3-0.6％、余量为水，pH＝7.0-7.2；

(2)将步骤1)所得物置入发酵罐中进行发酵24-48小时，罐温为28-32℃，发酵罐搅拌速度为220-250rpm；发酵罐中的培养基的成分按质量百分数计包括：豆粉4-5％、蛋白胨0.1-0.15％、葡萄糖0.5-0.7％、淀粉2-3％、硫酸锰0.1％、硫酸亚铁0.06％、磷酸氢二钾0.2％、碳酸钙0.1％、消泡剂0.01％、余量为水，pH＝7.0-7.4；

所述萎缩芽孢杆菌的分类命名为Bacillus atrophaeus BA-7，于2015年12月21日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为武汉市武昌珞珈山中国典型培养物保藏中心(武汉大学)，保藏号为CCTCC NO：M 2015765。

如本发明实施例所示，将本发明菌株培养24小时之后，1000倍的稀释液具有高达87.2％(5组平行实验平均值)的油菜根肿病防治效果。

实现上述效果的机制在于，本发明菌株本身对于病原菌具有很好的抑制和灭杀作用，使得油菜根肿病的发生率大为降低。另外，如实验例1所示，本发明菌株对于农地中的秸秆或其它作物废弃物具有很好的腐熟作用，施用本发明菌株培养稀释液后，可在常温下有效分解秸秆或其它作物废弃物，并将藏身其中的病原菌释放出来，通过病原菌和萎缩芽孢杆菌的直接接触进一步实现本发明菌株对土壤中病原菌的全面作用。同时，分解后的秸秆或其他作物废弃物还能为下一季作物的生长提供更多的有机质，促进农作物的健康生长。