[发明专利]立达霉有关物质的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及农药技术领域，具体地说，是立达霉有关物质的测定方法。

背景技术

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱中，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。高效液相色谱法已在化学、医学、工业、农学、商检、法检等领域得到广泛的应用。

中国专利文献CN105223278A公开了一种固相萃取液质联用法测定葡萄酒中甲霜灵、多菌灵的方法，包括先调节待测葡萄酒的pH值，用乙腈对酒样进行液液萃取，加入氯化钠待溶液盐析后用固相萃取柱萃取乙腈层，通过固相萃取柱洗脱，收集净化后的洗脱液，继而转入旋转蒸发仪浓缩，用氮气吹干浓缩液，通过乙腈水溶液回溶后，注入液质联用仪进行分析，获得葡萄酒中甲霜灵、多菌灵的含量的步骤。中国专利文献CN104535671A公开了一种茄子中甲霜灵残留的检测方法，包括以下几个步骤：(1)样品处理：将采摘后的茄子置于破碎机中破碎，得到茄子浆；(2)提取：称取茄子浆20g于锥形瓶中，加入100mL的乙酸乙酯和丙酮混合液，在温度为35-40℃的条件下振荡提取60-70min，抽滤得清液，浓缩至近干，氮吹至干，用2mL乙腈复溶备用；(3)小柱分离：用5mL乙酸乙酯洗涤HLB小柱，再用5ml丙酮洗涤小柱，上样，用10mL体积比为1:2的乙腈和水混合液淋洗小柱，最后用10ml的乙腈洗脱，收集洗脱液，旋蒸至1ml，氮气吹干，采用乙腈定容至2ml，待检测；(4)检测：采用HPLC进行检测。但是关于本发明的立达霉有关物质的测定方法目前还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种立达霉有关物质的测定方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种立达霉有关物质的测定方法，所述的测定方法包括：

(1)专属性试验，

(2)稳定性试验，

(3)最大的有关物质测定。

一种立达霉专属性试验方法，所述的试验方法包括：

(1)酸破坏试验：取样品加盐酸溶液，置热水浴中加热，取出后放冷，用氢氧化钠中和，加流动相稀释，然后进行HPLC分析；

(2)碱破坏试验：取样品加氢氧化钠，置热水浴中加热，取出后放冷，用盐酸中和，加流动相稀释，然后进行HPLC分析；

(3)氧化破坏试验：取样品加过氧化氢，放置一段时间后取出，加流动相稀释，然后进行HPLC分析；

(4)加热破坏试验：取样品加流动相稀释，置100℃水浴中加热，取出后放至室温，然后进行HPLC分析；

(5)光破坏试验：取样品置于紫外灯下照射，加流动相稀释，然后进行HPLC分析。

所述的试验方法包括：

(1)酸破坏试验：取样品20mg加1mol/L盐酸溶液5mL，置热水浴中加热30min，取出后放冷，用1mol/L氢氧化钠溶液中和，加流动相稀释制成每1mL中含2mg样品的溶液，然后进行HPLC分析；

(2)碱破坏试验：取样品20mg加1mol/L氢氧化钠溶液5mL，置热水浴中加热30min，取出后放冷，用盐酸中和，加流动相稀释制成每1mL中含2mg样品的溶液，然后进行HPLC分析；

(3)氧化破坏试验：取样品20mg加30％过氧化氢5mL，放置1小时后取出，加流动相稀释制成每1mL中含2mg样品的溶液，然后进行HPLC分析；

(4)加热破坏试验：取样品加流动相稀释制成每1mL中含2mg样品的溶液，置100℃水浴中加热2小时，取出后放至室温，然后进行HPLC分析；

(5)光破坏试验：取样品置于紫外灯下照射24小时，称取20mg加流动相稀释制成每1mL中含2mg的溶液，然后进行HPLC分析。

HPLC分析的条件为：C18柱，柱温是30℃，检测波长225nm，流速1.5ml/min，流动相为甲醇：水＝5:95。

一种立达霉稳定性试验方法，所述的稳定性试验方法包括以下步骤：称取样品并用流动相溶解，在0-24h内在HPLC进样分析，记录色谱图，以主峰峰面积考察溶液的稳定性。