[发明专利]一种微流控芯片及外泌体捕获和检测的研究方法

权利要求书

1.一种采用微流控芯片进行外泌体捕获和检测的方法，该微流控芯片由基片和膜片组成，所述膜片上设有曲形混合通道、收集池、连接通道、进样口和出液口；其特征在于：

其中，第一进样口(6a)和第二进样口(6b)通过连接通道(5)与第一曲形混合通道(3a)相连；第一曲形混合通道(3a)通过连接通道(5)与第一收集池(4a)相连，且在第一曲形混合通道(3a)与第一收集池(4a)之间设有第三进样口(6c)；第一收集池(4a)通过连接通道(5)与第二曲形混合通道(3b)相连；第二曲形混合通道(3b)通过连接通道(5)与第二收集池(4b)相连，且在第二曲形混合通道(3b)与第二收集池(4b)之间设有第四进样口(6d)；第二收集池(4b)与出液口(7)相连；

在微流控芯片的第一进样口(6a)加入第一预定类型材料和第二预定类型材料的混合物，在第二进样口(6b)加入第三预定类型材料，驱动第一预定类型材料、第二预定类型材料和第三预定类型材料在第一曲形混合通道(3a)处混合，形成第一预定类型材料、第二预定类型材料和第三预定类型材料的复合物A，通过磁铁将复合物A在第一收集池(4a)处富集；在第三进样口(6c)加入第四预定类型材料，驱动复合物A和第四预定类型材料在第二曲形混合通道(3b)处混合，形成复合物A和第四预定类型材料的复合物B，通过磁铁将复合物B在第二收集池(4b)处富集，将微流控芯片置于荧光显微镜下，考察复合物B的量；

所述第一预定类型材料为磁性纳米粒子，粒子表面连接有抗外泌体表面抗原的抗体；第二预定类型材料为含有外泌体的细胞培养液、血清或其它体液；第三预定类型材料为一抗；第四预定类型材料为荧光二抗。

2.按照权利要求1所述外泌体捕获和检测的方法，其特征在于：第三进样口(6c)开口于连接通道(5)侧方。

3.按照权利要求1所述外泌体捕获和检测的方法，其特征在于：第四进样口(6d)开口于连接通道(5)侧方。

4.按照权利要求1所述外泌体捕获和检测的方法，其特征在于：所述基片为玻璃；所述膜片为聚二甲基硅氧烷；玻璃基片和膜片为不可逆封接。

5.按照权利要求1-4任一所述外泌体捕获和检测的方法，其特征在于：第一曲形混合通道(3a)和第二曲形混合通道(3b)的长度、宽度和深度相同；长度为10～100毫米；宽度为10～1000微米；深度为10～1000微米。

6.按照权利要求1-4任一所述采用微流控芯片进行外泌体捕获和检测的方法，其特征在于：第一收集池(4a)和第二收集池(4b)的长度、宽度和深度相同；长度为0.1～10毫米；宽度为0.1～10毫米；深度为10～1000微米。

7.按照权利要求1所述外泌体捕获和检测的方法，其特征在于，具体过程如下：

——将第一预定类型材料和第二预定类型材料混合，4℃震荡过夜，使第一预定类型材料与第二预定类型材料充分结合；

——在第一进样口(6a)加入第一预定类型材料与第二预定类型材料的混合物；

——在第二进样口(6b)加入第三预定类型材料；

——驱动第一预定类型材料、第二预定类型材料和第三预定类型材料在第一曲形混合通道(3a)处混合，形成第一预定类型材料、第二预定类型材料和第三预定类型材料的复合物A；

——在第一收集池(4a)的下方放置磁铁(9)，将复合物A富集在第一收集池(4a)内；

——在第三进样口(6c)加入第四预定类型材料；

——驱动复合物A和第四预定类型材料在第二曲形混合通道(3b)处混合，形成复合物A和第四预定类型材料的复合物B；

——在第二收集池(4b)的下方放置磁铁(9)，将复合物B富集在第二收集池(4b)内；

——将微流控芯片置于荧光显微镜下，考察复合物B的量。