[发明专利]一种检测血清中异常脱羧凝血酶原的蛋白芯片、试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种检测异常脱羧凝血酶原的蛋白芯片，其特征在于：

所述蛋白芯片的基质载片上至少包括一个检测亚区，一个所述检测亚区检测一份血清样品；所检测亚区内设置有检测斑区域和对照斑区域，所述检测斑区域有固定DCP特异性抗体形成检测斑，所述对照斑区域有固定牛血清白蛋白形成对照斑；同一个检测斑区域内的所有检测斑上的物质的浓度相同；

每一个所述检测斑固定的DCP特异性抗体的总量为3nl,是进行6-10次喷涂，每次喷点300－500pl而成。

2.根据权利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于，所述检测斑是在4-8摄氏度环境下喷点而成。

3.根据权利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于，所述DCP的特异性抗体为鼠抗人DCP。

4.根据权利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于，所述基质载片上具有多个所述检测亚区，所述每个检测斑区域包括排列成1排的4个检测斑，所述对照斑区域包括排列成1排的4个对照斑；所述检测斑和对照斑排成平行的两列。

5.根据权利要求1-4任一所述的蛋白芯片，其特征在于，所述检测亚区之间设置有凸起作为物理隔断。

6.权利要求1-5任一所述用于检测异常脱羧凝血酶原的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：

每一个所述检测斑上固定的DCP特异性抗体进行6-10次喷点，每次喷点300－500pl，喷点总量为3nl。

7.一种检测异常脱羧凝血酶原的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1-5任一所述的蛋白芯片。

8.权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，还包括，HRP标记的凝血酶原多克隆抗体，HRP化学发光底物液；所述HRP标记的凝血酶原多克隆抗体为兔源抗体，与所述检测斑上固定的DCP特异性抗体来源于不同物种。

9.权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，还包括用于洗涤和稀释的常规试剂PBST和PBS。

10.一种检测凝血酶原和DCP的方法，其特征在于：采用权利要求1-5任一所述的蛋白芯片，包括如下步骤：

将待测血清样本稀释后滴加在所述蛋白芯片的检测亚区上，孵育后，用PBST洗涤检测亚区，去除非特异结合物；

加入用PBS稀释的HRP标记的凝血酶原抗体,孵育后，用PBST洗涤，去除非特异结合物；

加入HRP底物发光液，用化学发光扫描仪对蛋白芯片进行扫描，分别得到稀释后待测血清样本中的DCP发光像素值；

所述孵育指37℃孵育30分钟。