[发明专利]一种包含CPEB1基因负调控区域的慢病毒载体、及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201610515062.5 | 申请日： | 2016-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN107557387A | 公开（公告）日： | 2018-01-09 |
| 发明（设计）人： | 阮庆国;王绍文;李凤洁;万晓春 | 申请（专利权）人： | 深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司44202 | 代理人： | 郝传鑫,熊永强 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 包含 cpeb1 基因 调控 区域 病毒 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
技术领域
本发明涉及生物医药材料领域，具体涉及一种包含CPEB1基因负调控区域的慢病毒载体及其制备方法和应用。
背景技术
胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白(cytoplasmic polyadenylation element binding protein,CPEB)是一种mRNA结合蛋白，在无脊椎动物和脊椎动物中均发挥着重要生物功能。有研究表明CPEB1的大量表达与角膜移植免疫排斥反应密切相关，而且CPEB1调控多种组织、器官的基因表达，并与多种疾病的发生发展有关。
发明人课题组通过研究角膜移植术后免疫排斥反应相关的microRNA谱，发现角膜免疫排斥反应与miR-122及其靶基因CPEB1相关，但microRNA-122及其靶基因CPEB1如何在角膜移植排斥中起作用还不清楚。
因此，需要提供一种能用于研究microRNA-122及其靶基因CPEB1在角膜移植排斥中的作用的方法。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一种包含CPEB1基因编码区及其3‘UTR调控区域以及microRNA-122结合位点突变的慢病毒载体和重组慢病毒及其应用，此外，本发明还提供了一种宿主细胞。
第一方面，本发明提供了一种包含CPEB1基因负调控区域的慢病毒载体，为在pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒质粒的多克隆位点插入CPEB1编码基因序列及其3’UTR序列得到的重组质粒。
优选地，所述CPEB1编码基因序列的NCBI登录号为NM_030594。
优选地，所述CPEB1编码基因序列的3’UTR序列为SEQUENCE ID NO:1所示的核苷酸序列。
SEQUENCE ID NO:1：
GATTCCAGCTAGAGGAGCTGGCCTTGCCCAGTGTCCTGTGGTGCCAAAGGCTGTCAAGTCAGGCAGCAACTCGCTGCACAGGCGCCATGGGAGCTAGCTTTGCGCAGACAAGGGAGAATCGTAGTCACCTTTGTACTTGCTAACTCTGTCTTTGTTTCTGCACTAATTAATGCACAATGAGTTTTGTCAGGTCTTGTTTTCAGTGGGGTGTGCCAGAGCAAGGACCCTCGGCTCACCCTCAAGCAATTGTAGTTTTCCCAGATTCTAGTTCCTCATTTTGCAAATGAAAATAACAACAACAACCACTGTGTCCAGAAGGTCTGACACAGATGCCTACACTTGGGTTTATTTATTAAAGCGCTTTTTACATTCCTTGCAATACTGATGGTGGTGATGCGCAGGTCTCATTGGTTCGTTCATTCTGCAGTTGCCATACAGTGCCTTTCCATTGATTTAACCCCCACCTGAACGGCATCAATTGAGTGTTCAGCTGGTGTTTTTTACTGTAACAAACAAAGGAGACTTTGCTCTTCATTTAAACCAAATCATATTTCATAGTTTACGCTCGAGGGTTTTTACTGGTTCCTTTTTACACTCCTTAAAACAGTTTTTAAGTCGTTTGGAACAATATATTTTTTTTTCTTTCTTGGCAGCTTTTAACATTATAGCAAATTTGTGTCTGGGGGACTGCTGGTCACAGTTGCAAATCAAAGCATTTGTAACCAAGAGAAAAATTATTTTATTTAAAACTGGACCGGAGGAAAAGTCTGAGCAGCTGCTGTATATAGTTTTAAATGGTTTGTGGCACCTTATGTTGCACTTATGTTGGGGGAGGGTTGATAGAAGTTTTTAATCACAGTCACAGGACTTTTTCTTTTGTAACTGAGCTTAAAAATTAAAAAAAAAAAAAAAAGGGCTGCTTTTTGGTGGGGGCAGGTGAAGGCTCACAGGAGCCCTTTCTCTTAGAGGGGCAAATACCCTTCCTTACAACTTTTATTTGACGAATGTATGAATCAACAGTTACAGTTGACAAAGACGCTACTGGAATTGAAAACTTGACTTTTCTTTTTAATTTAACGATTACTTGCCTCTCTTAGGGAAGCTGTGTGCCAAAGAGCCAGTGTCATAACCCCTCCCTCCTGCTGAGCTGATGTTGCATTGTTGCATATCCCAGCTACTCTGTGGGTTTTGTGAAGCTGTGTGTGAAGTCTCTACCTCATTGTTGTATATGCAGGCAAGACTGCACTCTCCTACAGATGTGTGGAGTAAGCTGTGGTGTAATTTTTTTGGCACATAATAAACACGTTGCAGC
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