[发明专利]一种柴辛感冒注射液的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药领域，尤其涉及一种柴辛感冒注射液的检测方法。

背景技术

柴辛感冒注射液收载于国家中成药标准汇编内科肺系(一)分册，它是由柴胡和细辛两味药材制成的，具有解表退热的功效，用于感冒引起的鼻塞流涕，喷嚏、咳嗽、头痛，恶寒发热，全身不适等症。

柴辛感冒注射液现行标准(WS-11114(ZD-1114)-2002)中鉴别(1)为对细辛药材的鉴别，规定：柴辛感冒注射液供试品色谱中，与细辛对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的主斑点。申请人在对多批次产品的检验过程中发现，供试品色谱与对照药材色谱相比较，经常出现少一个斑点或者斑点很不明显的情况，对产品质量的判断造成困扰。

发明内容

本发明的目的在于提供一种柴辛感冒注射液的检测方法，该方法有助于提高柴辛感冒注射液的安全可控性。

本发明中所述的柴辛感冒注射液是由柴胡和细辛两味药材经提取加工制成的灭菌水溶液。

本发明提供的柴辛感冒注射液的检测方法，包括对黄樟醚的薄层色谱检查和/或含量限度检测，薄层色谱检查：按所含细辛药材量计，当供试品点样量不高于100倍细辛对照药材点样量时，供试品色谱中如显黄樟醚斑点，与细辛对照药材色谱中所显的黄樟醚斑点比较，不得更深；含量限度检测：每1ml注射液含黄樟醚不得超过8μg，优选不超过3μg。

黄樟醚薄层色谱检查方法优选：取柴辛感冒注射液20ml，用乙醚振摇提取2次，每次15ml，分取乙醚液，挥至近干，残渣立即加石油醚0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取细辛对照药材1g，置圆底烧瓶中，连接挥发油测定器，自测定器上端加水，至溢流入烧瓶中为止，再加入石油醚1ml，连接回流冷凝器，加热至沸，并保持微沸2小时，放冷，取石油醚液作为对照药材溶液；照《中国药典》2015年版一部附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液1μl～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶1的正己烷—醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中如显黄樟醚斑点，与细辛对照药材色谱中所显的黄樟醚斑点比较，不得更深。

黄樟醚含量限度检测可以采用高效液相色谱法、气相色谱法等检测方法。当采用高效液相色谱法测定黄樟醚含量时，可以采用梯度洗脱也可以采用等度洗脱，采用梯度洗脱的色谱条件优选：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱，洗脱过程流动相A和B的比例变化为：0～20min，A相40％，B相60％；20～30min，A相40％-45％，B相60％-55％；30～35min，A相45％-47％，B相55％-53％；柱温：25-35℃；检测波长为230nm～240nm；采用等度洗脱的色谱条件优选：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为40:60～44:56的乙腈-水为流动相；柱温：25-35℃；检测波长为230nm～240nm。当采用气相色谱法测定黄樟醚含量时，优选色谱条件为：非极性或中等极性毛细管柱，程序升温：初始温度100℃，保持12分钟，以每分钟5℃的速率升温至130℃，再以每分钟25℃的速率升温至290℃，保持3分钟，进样口温度150℃～300℃，检测器温度200℃～300℃。

本发明的创新之处在于：本发明针对原标准中鉴别(1)存在的供试品色谱中经常比对照药材色谱少一个斑点或是斑点不明显的问题，通过制备薄层色谱和硅胶柱色谱方法进行分离纯化，并采用气质联用分析，确定该斑点对应的化学成分为黄樟醚，并建立了黄樟醚的薄层检查方法和含量限度检测方法，对柴辛感冒注射液中黄樟醚的含量进行了控制，提高了产品的安全可控性。

下面将通过实验例对本发明作进一步说明。

实验例1 化学成分归属研究

1、利用薄层色谱收集目标成分

将细辛挥发油点于制备硅胶G薄层板上，以正己烷—醋酸乙酯(15∶1)为展开剂，上行法展开，晾干，刮板，洗脱，得目标成分粗产物。

2、对目标成分粗产物进行纯化

目标成分粗产物，经硅胶柱色谱，正己烷—醋酸乙酯(30∶1)洗脱，薄层色谱检查，合并相同流分，得目标成分。

3、目标成分化学成分归属

目标成分经GC-MS分析，目标成分的分子量与文献报道的黄樟醚一致，再经薄层色谱、气相色谱和液相色谱检测验证，目标成分确定为黄樟醚。

实验例2 液相色谱法测定黄樟醚含量

一、样品与试剂