[发明专利]土壤土曲霉次生代谢产物中抗阿尔茨海默病化合物及分离制备

说明书

本发明提供了具有抗阿尔茨海默病作用的新杂萜类化合物及其分离制备方法，该化合物来源于土壤的土曲霉次生代谢产物，本发明通过对土壤来源Aspergillus terreus QCX1‑1固体发酵和对其发酵产物的工业酒精(95％乙醇)提取物进行分离纯化，得到3个新化合物。运用多种波谱分析手段和其他方法，确定其结构为杂萜类化合物，通过对这3个新化合物的BACE1抑制活性评价，发现其中2个化合物能够在体内及体外对BACE1产生极强的抑制活性，可以作为治疗抗阿尔茨海默病药物开发的先导化合物。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及抗阿尔茨海默病化合物，具体涉及土壤土曲霉次生代谢产物中的抗阿尔茨海默病化合物及其分离制备方法和用途，主要涉及分离纯化的过程，结构确认，BACE1抑制活性及抗阿尔茨海默病活性考察等。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)是一种常见的中枢神经系统变性病，病程呈现慢性进行性，是老年期痴呆最多见的一种疾病类型，据不完全统计，全球该疾病的患病人数高达4860万，其中我国患者数为684万。该疾病的主要表现为认知功能障碍、人格改变、渐进性记忆障碍和语言障碍等，严重影响患者的工作与生活功能。AD的发病机制与病因尚未完全阐明，β淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑、tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结等是该疾病最主要的特征性病理改变。BACE1(β-site amyloidprecursor protein cleaving enzyme 1)是AD病发病过程中关键蛋白，能够促进β淀粉样蛋白的沉积，从而加剧疾病的发展，因此，寻找有效的BACE1抑制剂能够对AD病的治疗起到极大的促进作用。

天然产物是药物最常见的来源，据统计，从上世纪八十年代年至今，每年30-40％的上市药物直接或间接来源于天然产物，其中2010年，天然产物相关来源的药物比例高达50％。真菌次生代谢产物的种类极为丰富，随着近年对其研究的不断增多，越来越多化学结构新颖，且活性较强的化合物被发现，为新药的研发奠定了一定的基础。因此，从真菌中分离具有抗阿尔茨海默作用的新的天然产物具有极为重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供具有抗阿尔茨海默作用活性的新的杂萜类化合物及其来源、分离纯化方法和其应用。

本发明提供的具有抗阿尔茨海默作用活性的新的杂萜类化合物为具有以下式(1)所示结构1-3：

化合物1：土壤土曲霉菌素A(Asperterpenes A)

化合物2：土壤土曲霉菌素B(Asperterpenes B)

化合物3：土壤土曲霉菌素C(Asperterpenes C)

式(1)。

本发明提供的具有抗阿尔茨海默作用活性的新的杂萜类化合物的制备方法，包括以下步骤：

S1.种子培养基的制备：

将分离于长江滩涂的土曲霉Aspergillus terreusQCX1-1菌株接入种子培养基，利用摇床培养并得到种子培养液；上述摇床培养的条件为：摇床转速100～120rpm，培养时间为3～5天，培养温度25～28℃；所述种子培养基的组分为：麦芽膏3g，葡萄糖10g，蛋白胨5g，酵母膏3g及水1L；

S2.接种：

利用固体发酵的方式进行菌种培养，大米固体发酵培养基加入培养瓶中，接种S1中得到的种子培养液，静置培养；所述大米固体发酵培养基均为将大米200g及水200mL加入1L的三角锥形瓶中；所述静置培养温度为25～28℃，培养时间为25～30天；