[发明专利]9-羟基-3-异吩恶嗪酮在基质辅助激光解吸电离中的用途

说明书

本发明提出了9‑羟基‑3‑异吩恶嗪酮在基质辅助激光解吸电离中的用途以及测定待测颗粒质量的方法。9‑羟基‑3‑异吩恶嗪酮的酸性很弱，对颗粒样品无腐蚀，并且，其最大吸收波长在可见光处，很多大分子在可见光区域吸收很弱，从而能有效降低激光引起的样品激发及破碎。9‑羟基‑3‑异吩恶嗪酮用于基质辅助激光解吸电离，可实现完整颗粒，尤其是大颗粒或细胞等没有坚硬外壳的生物颗粒的高效解吸和电离。本发明实施例所提出的测定待测颗粒质量的方法从技术上克服了常用有机小分子基质无法保持细胞等没有坚硬外壳颗粒完整性的缺陷，且本发明实施例所采用的基质，背景干扰小，解吸电离效率高，适用于多种无机、有机和生物颗粒的质量分析和测定。

技术领域

本发明涉及检测领域，具体地，本发明涉及9-羟基-3-异吩恶嗪酮在基质辅助激光解吸电离中的用途，更具体地，本发明涉及9-羟基-3-异吩恶嗪酮在基质辅助激光解吸电离中的用途以及测定待测颗粒质量的方法。

背景技术

颗粒是一种广泛存在的基本物质形式，如生物领域的病毒、细菌、细胞等，环境中的粉尘、气溶胶等，材料中的多种微米、纳米颗粒，药物中的微胶囊、纳米药物和药物载体等。这些颗粒在生物医药、环境及材料科学等领域发挥着重要的作用，因此对这些颗粒的表征至关重要。颗粒的质量是颗粒表征的一个重要的物理参数，其能够综合反映颗粒的体积及密度信息。另外，相比于容易随外界压力条件而变化的体积及密度而言，颗粒的质量能更准确的实现颗粒种类的区分和鉴定以及颗粒聚集和生长过程的表征。

离子阱质谱是实现颗粒质量测定的一种有效方法。相比于传统的重量分析或流式细胞而言，其具有操作简单、测定准确等优势。在离子阱质谱中，带电颗粒被囚禁于阱中心。随着频率的扫描，不稳定的颗粒依次抛出阱外并被电荷检测器所探测，从而实现颗粒的质量分析。颗粒离子的质荷比m/Z和带电量Z可分别根据抛出频率及电荷检测器的信号强度计算获得。通过对上百个颗粒质量的统计分析，从而获得其平均质量和质量分布。利用离子阱质谱，人们已成功地实现了多种颗粒的测量。根据所测得的质量，实现了颗粒表面吸附量等的测定。

然而，利用离子阱质谱实现颗粒质量测定仍需要进一步的开发和改进。

发明内容

本发明是基于发明人对以下问题和事实的发现而提出的：

在进行质谱之前，利用基质辅助激光解吸电离(MALDI)源进行颗粒解吸电离，然而，目前的MALDI仍然不能实现细胞等没有坚硬外壳的生物颗粒的分析。发明人研究发现，这是由于在目前MALDI解吸中，所用的基质如3-羟基吡啶羧酸(3HPA)、芥子酸(SA)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(4HCCA)和2-(4-羟基-偶氮苯)-苯甲酸(HABA)为酸性，在与颗粒混合的过程中很容易引起颗粒的破碎；另外，上述的酸性基质的吸收波长在紫外波段，颗粒对紫外光的吸收以及激光对颗粒的轰击也会对颗粒的完整性产生破坏。

针对上述问题，发明人提出了一种以9-羟基-3-异吩恶嗪酮为基质的可见光MALDI新方法，该方法可用于实现完整颗粒的高效解吸和电离。

在本发明的第一方面，本发明提出了9-羟基-3-异吩恶嗪酮在基质辅助激光解吸电离中的用途。发明人发现，9-羟基-3-异吩恶嗪酮的酸性很弱，对颗粒样品无腐蚀，并且，其最大吸收波长在可见光处，很多大分子在可见光区域吸收很弱，从而能有效降低激光引起的样品激发及破碎。9-羟基-3-异吩恶嗪酮用于基质辅助激光解吸电离，可实现完整颗粒，尤其是大颗粒、细胞等没有坚硬外壳的生物颗粒的高效解吸和电离。

在本发明的第二方面，本发明提出了一种测定待测颗粒质量的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将待测颗粒与9-羟基-3-异吩恶嗪酮接触；将接触后产物进行基质辅助激光解吸电离和离子阱质谱分析；以及基于离子阱质谱图，确定待测颗粒的质量。本发明实施例所提出的方法从技术上克服了常用有机小分子基质无法保持细胞等没有坚硬外壳颗粒完整性的缺陷，且本发明实施例所采用的基质，背景干扰小，解吸电离效率高，适用于多种无机、有机和生物颗粒的质量分析和测定。