[发明专利]硫化氢在制备治疗AMPK作为靶点的炎症性贫血药物中的用途

说明书

技术领域

本发明属药物制药领域，涉及AMPK及硫化氢在制药中新的药用用途，尤其涉及AMPK及硫化氢在制备炎症性贫血药物中的用途。

背景技术

现有技术公开了AMPK是机体能量代谢的重要开关，以及在代谢性疾病中的应用。文献报道AMPK亦参与对炎症的调控，具有抗炎的用途。硫化氢是人体内半胱氨酸等的代谢产物。虽然体内性硫化氢的浓度仅在10-100μmol/L，但研究表明硫化氢广泛参与疾病的发生与发展，尤其对机体炎症有明显的调节作用。

临床实践中炎症性贫血又称慢性病贫血，是临床第二常见的贫血疾患。炎症性贫血高发于各类急慢性感染(发病率在18％-95％不等)、肿瘤相关疾病(30％-77％)、自身免疫性疾病(8％-71％)以及慢性肾病患者(23％-50％)。炎症性贫血严重降低患者生活质量，并显著增加患者死亡率，对公共卫生威胁极大。

目前临床常规的治疗炎症性贫血的手段包括输血、铁补充剂以及促红细胞生成药物，然而实践证明这三类方法有着各自明显的不足，在安全性和有效性上难以完全满足临床需要。因此，国内外各方专家试图从不同途径着手开发新型的治疗方案。人们期盼有更加安全、有效的炎症性贫血治疗药物早日问世。

现有研究表明，铁调素是炎症性贫血的关键致病因子，而硫化氢能够抑制炎性条件下铁调素的激活。但AMPK在其中的作用，以及AMPK及硫化氢对于炎症性贫血的疗效尚不明确。

发明内容

本发明的目的是提供AMPK及硫化氢在制药中的新用途，具体涉及硫化氢在制备治疗AMPK作为靶点的炎症性贫血药物中的用途。

本发明采用硫化氢外源性供体硫氢化钠(NaHS)、以及AMPK激动剂AICAR和二甲双胍进行抑制炎性铁调素表达、治疗炎症性贫血的试验，包括小鼠原代肝 细胞炎性铁调素试验、小鼠急性炎症性血铁过低模型试验、小鼠慢性炎症性贫血模型试验等。试验结果显示，硫化氢外源性供体NaHS能够治疗慢性炎症性贫血小鼠的贫血症状、改善血象、提高血清铁含量、抑制肝脏JAK2/STAT3通路的激活以及下游铁调素的表达，提示硫化氢能够用于制备治疗炎症性贫血的药物，并且NaHS的治疗效果是通过激活肝脏AMPK实现。

进一步研究发现，AMPK激动剂AICAR和二甲双胍能够抑制炎症刺激下小鼠原代肝细胞铁调素的表达，改善小鼠小鼠急性炎症性血铁过低症，缓解小鼠慢性炎症性贫血症状，提示AMPK是炎症性贫血的新型治疗靶点，AMPK能够作为药物靶点用于制备治疗炎症性贫血的药物。

附图说明

图1显示NaHS以AMPK依赖的方式提高松节油(turpentine,Tur)诱导下慢性炎症性贫血小鼠的红细胞计数(RBC)以及血红蛋白(HGB)含量，其中###是与Vec组比较p&lt;0.001；*和**分别是与Vec+松节油组比较p&lt;0.05和p&lt;0.01；&是与Vec+NaHS+松节油组比较p<0.05。

图2显示NaHS以AMPK依赖的途径维持炎症性贫血小鼠的红细胞形态，以Wright-Giemsa法染色，箭头指示被破坏的红细胞。

图3显示NaHS降低炎症性贫血小鼠血清的铁调素水平，其中##是与Vec组比较p&lt;0.01；*是与Vec+松节油组比较p&lt;0.05。

图4显示NaHS升高炎症性贫血小鼠的血清铁含量，其中##是与Vec组比较p&lt;0.01；*和**分别是与Vec+松节油组比较p&lt;0.05和p&lt;0.01。

图5显示NaHS升高炎症性贫血小鼠血清转铁蛋白(transferrin，Tf)饱和率，其中##、###是与Vec组比较p&lt;0.01和p&lt;0.001；*是与Vec+松节油组比较p&lt;0.05。

图6显示NaHS激活AMPK，抑制炎症性贫血小鼠肝脏JAK2/STAT3通路的激活，以Western Blot检测蛋白表达及磷酸化水平，以ACC的磷酸化反应其上游AMPK的活性。

图7显示AMPK激动剂AICAR显著抑制IL-6刺激下Huh7肝细胞系铁调素启动子活性(HAMP promoter)以及STAT3活性(SIE reporter)，其中###是与对照组比较p&lt;0.001；**和***分别是与IL-6组比较p&lt;0.01和0.001。