[发明专利]一种青钱柳总黄酮的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于提取分离领域，尤其涉及一种青钱柳总黄酮的制备方法。

背景技术

黄铜类化合物具有心血管系统活性、抗菌及抗病毒活性、抗肿瘤活性、抗氧化自由基活性、抗炎镇痛活性、保肝活性等多种生物活性。青钱柳叶含有大量的黄酮类化合物，具有降血糖、降血压、降血脂、增强肌体免疫力、抗氧化、防衰老等功能。目前，青钱柳中黄酮类化合物的提取方法较复杂、工艺成本高，不利于大规模工业化。另外，传统的原料预处理方法多为高温干燥，同时，传统的水体方法也需要采用高温加热，才可以提取出较大量的提取物，不仅会大量破坏青钱柳中的有效成分，同时增加工艺能耗。

发明内容

本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，以克服现有技术的缺陷。

为实现上述目的，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，青钱柳叶经预处理后，依次进行酶法提取和柱层析法纯化，获得青钱柳总黄酮；其中，酶法提取得到的提取液经活性炭脱色后再进行柱层析纯化。

进一步，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，还可以具有这样的特征：具体步骤为：(a)、将青钱柳叶干燥、粉碎，过40-50目筛；(b)、在过筛后的青钱柳叶中加入其10-12倍重的提取溶剂，调节pH至4.5-5.5，然后加入其质量0.3％-1.5％的复合酶，于50-55℃提取4-5h，过滤得到提取液；(c)、在提取液中加入活性炭，吸附过滤得到脱色提取液；(d)、将脱色提取液浓缩至原体积的1/4-1/3，得到浓缩液；(e)、将浓缩液上大孔树脂柱，先用蒸馏水洗，然后用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，干燥至恒重，获得青钱柳总黄酮。

进一步，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤(a)中，干燥温度不高于60℃。

进一步，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤(b)中，复合酶由纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶复合而成，其质量比为2-3:1:1。

进一步，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤(b)中，提取溶剂为水；提取完成后，于85-90℃灭活30-50min。

进一步，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤(b)中，过滤采用离心过滤，转速为4000-4500r/min，时间为20-30min。

进一步，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤(c)中，活性炭的加入量为提取液质量的0.4-2％，并于45-50℃吸附10-30min。

进一步，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤(e)中，上样的浓缩液与大孔树脂柱中大孔树脂的体积比为2-3:1，上样流速为0.5-1BV/h。

进一步，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤(e)中，蒸馏水的用量为2-2.5BV；乙醇溶液为80-85％乙醇，用量为4-6BV，洗脱流速为1.5-2BV/h。

进一步，本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤(e)中，大孔树脂的型号为AB-8或D101。

本专利的有益效果在于：本发明提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，原料干燥温度不超过60℃，避免破坏有效成分。采用酶法提取，提取条件温和，能耗低；采用由纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶组成的复合酶，有效提高青钱柳总黄酮的提取率，增加提取价值，同时可采用水作为提取剂，减少有机溶剂的使用。采用活性炭脱色可以改善成品外观，在加热条件下进行吸附，可优化脱色程度，同时较温和的去除杂质。柱层析纯化过程前，依次进行灭活、离心过滤、活性炭脱色等过程，可以逐步去除杂质，可提高成品纯度，同时可以缩减柱层析纯化步骤和缩减，缩短生产周期，降低生产成本，简便操作。本发明的制备方法高效，绿色节能，可大规模生产、工业化。

具体实施方式

实施例一

本实施例提供一种青钱柳总黄酮的制备方法，将原料青钱柳叶预处理，然后依次进行酶法提取、活性炭脱色好柱层析纯化过程，最终获得青钱柳总黄酮，具体步骤为：

(a)、预处理：将青钱柳叶于60℃干燥，粉碎过40目筛。

(b)、酶法提取：在粉碎过筛后的青钱柳叶中加入10倍重的水，调节pH至4.5，然后加入其质量0.3％复合酶，于50℃提取4h，提取后，升温至90℃，灭活30min，离心过滤得到提取液；

其中，复合酶由纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶复合而成，质量比为2:1:1。