[发明专利]一种分子印迹荧光微球阵列检测卡及其应用

说明书

技术领域

本发明属于材料科学与化学分析检测领域，具体来说是一种分子印迹荧光微球阵列检测卡及其应用。

背景技术

乙酰甲胺磷(Acephate)又名高灭磷，属于低毒杀虫剂，但由于使用量的逐年增加，乙酰甲胺磷的残留问题亦引起人们的重视。目前国内外对乙酰甲胺磷的检测局限于气相色谱，但是出现前处理繁琐、检测灵敏度低等缺点。

分子印迹技术是制备对于特定目标分子具有特异识别能力的材料的技术，在仿生传感器、人工酶催化剂、固相萃取、农药残留检测等诸多领域显示出广阔应用前景。其中，分子印迹技术用于农残检测已经越来越广泛，研究者已经以多种农药作为模板分子，制备了分子印迹聚合物，并用于实际环境样品的检测中。早期分子印迹聚合物多为采用本体聚合法制备的为块状聚合物，且后处理繁琐。相比之下球状聚合物吸附性能和选择性能更高，种球溶胀聚合制备的印迹微球粒径均一，性能良好。

量子点(Quantum Dot)是一种粒径为1～100nm的半导体纳米粒子,受激发后可产生荧光，具有稳定性强、相容性好和寿命长等诸多优点，是一种新型的性能优良的荧光染料，已作为探针广泛用于生物体和有机物的荧光标记中。目前，量子点与分子印迹技术结合进行农药残留分析处于探索阶段。

微球阵列是类似于“胶体阵列”的一种微球的有序排列。通过自组装沉降法将分子印迹荧光微球制备成紧密的单层排列的微球阵列，利用其高识别特性对目标物进行识别与富集，相比于粉末状态的QD-MIPs，将其制备成阵列，增大了QD-MIPs与目标物的接触面，缩短富集时间。另外，将微球阵列制备成速测卡片，有效的防止了由于微球沉降而引起的荧光不稳定的现象，将传统的液体样品改成固体样品，简化了检测步骤，也是对荧光检测形式的一种创新。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分子印迹荧光微球阵列检测卡及其应用

为实现上述目的，本发明采用技术方案为：一种分子印迹荧光微球阵列检测卡，将荧光分子印迹微球阵列粘下固定于硬质卡片中即得到分子印迹荧光微球阵列检测卡。

采用水平沉积法、重力沉降法或垂直沉降法在经过亲水处理后的玻璃基底上组装一层荧光分子印迹微球阵列。

以低毒杀虫剂、硫代磷酸酯类有机磷农药为模板采用多步溶胀法制备分子印迹微球；再以量子点作为荧光标记物对分子印迹微球进行编码，即可得到荧光分子印迹微球，量子点的发射波长为500～600nm。

将十二烷基硫酸钠(SDS)，邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、聚苯乙烯微球和H₂O混合，室温搅拌溶胀，然后加入引发剂、甲苯、4.8％聚乙烯醇(PVA)水溶液和H₂O，室温搅拌溶胀，再加入模板分子、功能单体、交联剂、4.8％PVA水溶液和H₂O，室温搅拌溶胀，最后在N₂保护下反应20-28h，得到的微球洗涤后经索氏提取除去模板分子；即得到分子印迹微球(MIPs)。

在容器中分别加入0.01-0.03g十二烷基硫酸钠(SDS)，0.20-0.30mL邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、0.497g·mL^-1聚苯乙烯微球0.075-0.095mL和8-12mL H₂O，室温下，110-140rpm搅拌溶胀12-18h，至油滴消失，向反应体系中加入0.1-0.2g偶氮二异丁腈(AIBN)、2-3mL甲苯、8-12mL 4.8％聚乙烯醇(PVA)水溶液和10-15mL H₂O，室温110-140rpm搅拌溶胀1-3h，再加入0.1-0.2g乙酰甲胺磷(Acephate)、0.3-0.4g甲基丙烯酸(MAA)、2-3mL乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)、8-12mL 4.8％聚乙烯醇(PVA)水溶液、10-15mL H₂O，室温搅拌溶胀1-3h，最后在40-60℃、通N₂保护，160-200rpm搅拌反应20-28h，得到的微球用甲醇、热水和四氢呋喃洗涤，洗涤后的微球以体积比7:1的甲醇/乙酸作为溶剂，90-110℃索氏提取10-16h，共提取3次，以除去模板分子。将聚合物置于真空干燥箱中干燥20-28h，得到白色粉末状MIPs。

将氯仿和异丙醇加入到分子印迹微球(MIPs)中，超声震荡，加入量子点溶液，再超声分散，室温真空干燥，然后用无水乙醇洗涤，室温真空干燥即得荧光分子印迹微球(QD-MIPs)。