[发明专利]一种藏药大托叶云实的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种藏药大托叶云实的检测方法，属于医药技术领域。

背景技术

大托叶云实为豆科植物大托叶云实Caesalpinia crista L.的干燥成熟种子，藏族习用药。温肾，逐寒，用于肾寒病，胃寒。原质量标准收载于中华人们共和国卫生部颁标准(藏药部分)，标准号：WS3-BC-0003-95，标准中仅有理化鉴别。随着六味大托叶云实散等制剂的大量应用，大托叶云实的质量控制越发显得重要，但现有标准质量控制方法陈旧落后。

发明内容

针对现状的不足，本发明建立了大托叶云实药材一种新的检测方法，对于有效控制大托叶云实的质量具有重要的意义。

本发明的技术方案如下：

一种藏药大托叶云实检测方法，包括如下方法中的一种或几种：

1.鉴别方法一

取大托叶云实药材粉末0.5﹣2g，加盐酸溶液，超声处理10-40分钟后，水浴加热回流1-3小时，取出，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加40％-90％乙醇1-4ml，使溶解，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；另取大托叶云实对照药材适量，同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5﹣10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比3-5﹕1﹕1的正丁醇﹣冰醋酸-水混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

2.鉴别方法二

取大托叶云实药材粉末0.5﹣2g，加乙醚超声处理后，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2-10ml，使溶解，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；另取大托叶云实对照药材适量，同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5﹣10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比1﹕2﹕0.2﹕0.1的甲醇-乙酸乙酯﹣甲醇-甲酸混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；在紫外灯365nm下观察供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

3.含量测定方法

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L的柠檬酸钠为流动相A，体积比为8﹕2的混合溶剂DMF-四氢呋喃为流动相B，采用梯度洗脱，流动相B的时间-浓度变化为：0﹣15分钟保持1％，15﹣25分钟由1％升至18％，25﹣45分钟保持18％，45﹣60分钟由18％降至1％；检测波长为280nm；流速：0.8﹣1.2ml/min；理论塔板数以儿茶素计不低于2000。

对照品溶液的制备：取儿茶素、没食子酸对照品适量，精密称定，加70％乙醇制成每1ml各含50μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取大托叶云实粉末0.5﹣5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积比1﹕1的甲醇-6mol/L盐酸50mL，称定重量，回流提取30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加入70％乙醇10ml，使溶解，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5﹣10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

优选的，一种藏药大托叶云实的检测方法，包括如下检测方法中的一种或几种：

1.鉴别方法一

取大托叶云实药材粉末1g，加6mol/L盐酸溶液20ml，超声处理20分钟后，水浴加热回流2小时，取出，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加70％乙醇2ml，使溶解，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；另取大托叶云实对照药材适量，同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比4﹕1﹕1的正丁醇﹣冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

2.鉴别方法二

取大托叶云实药材粉末1g，加乙醚20ml，超声处理20分钟后，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml，使溶解，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；另取大托叶云实对照药材适量，同法制得对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比1﹕2﹕0.2﹕0.1的甲醇-乙酸乙酯﹣甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；在365nm下观察供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

3.含量测定方法