[发明专利]以一个多通阀为切换装置的停流型二维液相色谱及其应用

说明书

技术领域

本发明属于仪器分析领域，具体涉及一种停流型二维液相色谱，特别涉及一种以一个多通阀为切换装置的停流型二维液相色谱及其应用。

背景技术

二维液相色谱作为一种新型液相色谱分离技术，由于具有远超一维液相色谱的分辨率，因而备受国内外学者的亲睐，是当下色谱分离研究的热点。

由于多通阀对两维之间的连接和组分的转移起着至关重要的作用，因此一直被视为多维液相色谱的关键部分。多通阀主要由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成，转子上有一定数量的槽，起导流作用，而各个接口则为固定的，位于定子上面，用于连接管路，通过槽可以连通其两端的接口，而没有槽的位置，两端是互不相通的。当多通阀发生转动时，转子发生转动，从而槽的位置会发生改变，从而流动相的流向就会随之改变。而十通阀或八通阀由于转子表面导流槽较多，定子表面接口也较多，可同时连接多个流路并实现流路的切换，因而被广泛应用于多维液相色谱的切换。

目前国内外研究学者针对二维色谱的研究主要集中在连续环切换型二维液相色谱，在分析过程中，通过该阀门的切换作用，第一维液相色谱的流出组分连续按照一定的时间间隔全部或部分地转入第二维液相色谱系统，转移过程中第一维液相色谱不存在停流过程。这种二维液相色谱运行时两维液相色谱均不存在压力脉冲，且分析速度较快，具有分析效率高和操作方便的特点，但该方法仍有较多缺点。首先，该方法对第二维液相色谱系统的要求极高，一般要求该系统具备超高压液相色谱泵，但该泵的售价非常昂贵，且该泵对操作条件限制条件亦非常严格。近年来有国外学者对该系统进行了改良，采用高温分离以降低第二维液相色谱分析时的背压，但该方法对第二维色谱柱的色谱柱寿命影响极大。此外，由于该方法采用连续性环切换转移组分的方式，因此第二维液相色谱必须在一个定量环的填充时间内完成另一个定量环内组分的洗脱，这使得第二维液相色谱的分离时间极短，通常为30s左右，极大程度地降低了第二维液相色谱的分离效率。凝胶柱依赖于其分子筛效应，在蛋白质、肽及多糖等物质的分离和分子量测定中有着极其广泛的应用，然而由于该系统第二维液相色谱柱需在高压或高温条件下运行，且流速极高，而凝胶柱的运行条件常要求低压低流速，因此该系统无法使用凝胶柱作为第二维液相色谱使用，这限制了该系统在蛋白、肽和多糖方面的应用。此外，二维液相色谱常被国内外仪器商以整机进行销售，从而导致仪器价格非常昂贵，同时对于已经配备有液相色谱的用户来说亦造成了极大的资源浪费。

近年来，停流型二维液相色谱由于停流瞬间压力变化较大，易造成峰形骤变、检测信号不稳定、管路分流不稳定甚至泵和色谱柱易损坏等多种问题，因而较少受到国内外学者的亲睐，针对该系统的研究也因此较少。但停流型二维液相色谱的分离和分析时间不受第一维液相色谱的制约，因此其分辨率极高。此外，该系统对色谱设备的要求极低，成本低廉，甚至于两台低压液相即可组装成为一台二维液相色谱。因此，针对停流型二维液相色谱的研究具有极高的应用价值，未来其在复杂成分的分离分析方面具有广阔的前景。

发明内容

为了克服现有的停流型液相色谱流路停流瞬间压力变化较大且无法分流的问题，本发明的首要目的在于提供一种停流型二维液相色谱，该色谱采用一个多通阀为流路切换装置，成功解决了停流切换瞬间的压力突变问题，且成功实现了第一维色谱的分流，提高了停流型二维液相色谱的检测效率。

本发明的另一目的在于提供上述停流型二维液相色谱的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种停流型二维液相色谱，包括第一维分离部分、停流切换装置和第二维分离检测部分；

所述的停流切换装置是一个多通阀；

当处于采样状态时，第一维分离部分的流出组分经过分流装置分流，其中一个流路经过多通阀的2和1号位再通过压力平衡用定量环流向废液桶，另一个流路依次经过多通阀的3和4号位，再进入采样用定量环中进行填充，再经过7和8号位流向废液桶，此时第二维液相色谱泵的流出液经过5和6号位直接进入第二维液相色谱柱；若多通阀还有多余接口的话则用堵头封闭；

当采样结束时，设置第一维液相色谱泵的流速为0，同时转动多通阀，进入检测状态；此时，第一维分离部分分流装置的两个输出端通过多通阀的2号位和3号位相通，实现流路的封闭，从而使第一维色谱的管路压力得以保持；同时，第二维液相色谱泵的流动相经过5号位和4号位流入采样用定量环，再经过7号位和6号位流入第二维液相色谱柱中，再经过检测器进行检测。待第二维分析完成后，则重新进入第一维采样状态，依此循环至样品分析结束；