[发明专利]小分子多肽47aa的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别涉及小分子多肽47aa的应用。

背景技术

非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma，NHL)是造血系统最常见的肿瘤。NHL起源于淋巴结和其他结外淋巴组织的恶性肿瘤，约占我国全部恶性淋巴瘤的85％-90％，远高于欧美国家。近三十年来，NHL的发病率增长了一倍，在我国，每年新增患者约2.5万人。在发病率增长最快的肿瘤中位居第3位。目前，NHL的治疗主要以化学药物治疗及生物靶向治疗为主，但由于其极易复发及耐药性的存在，成为目前研究难治性肿瘤的热点和难点。NHL细胞的原发耐药及获得性耐药是化疗成功的主要障碍，其结果是肿瘤细胞对药物治疗的不敏感，并导致各种药物对人体正常组织的细胞毒作用。现有研究表明，淋巴瘤细胞和淋巴结基质构成的肿瘤微环境是影响NHL细胞耐药性的主要因素。

目前对非霍奇金淋巴瘤的治疗主要是内科保守治疗为主，主要采用利妥昔单抗、多柔比星、美罗华等，积极防治并发症等措施，尚无突破性进展。因此急需研究开发非霍奇金淋巴瘤治疗药物。

整合素是分布在细胞表面的由异源二聚体组成的跨膜糖蛋白，总共包含18种α亚基和8种β亚基，在不同的细胞类型中总共可以形成24种整合素。其中，β1整合素(Integrin beta1)是分布较为广泛介导细胞与胞外基质粘附信号的主要分子之一。大量研究表明，β1整合素在多种侵袭性癌症中高表达，由胞外段，跨膜结构域以及胞内尾端结构域组成。其中胞内尾端结构域负责传递信号级联反应活化下游通路，促进肿瘤的发生发展，同时也能接收胞内的信号，促进其自身的活化。在淋巴细胞白血病细胞中检测到整合素β1胞膜的高表达激活了MAPK/ERK的信号传导，通过维持抗凋亡蛋白mcl-1的蛋白水平，活化caspase-9和caspase-3并且抑制细胞色素C的释放，介导了肿瘤细胞对多柔比星的耐药。近期研究表明，TUBA1A(tubulin alpha1a)可以与β1整合素的胞内尾端结构域相互作用，并且促进β1整合素在胞膜的聚集。因此发明一种多肽竞争性的结合TUBA1A，显得迫在眉睫。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供一种小分子多肽47aa的应用，具有抗肿瘤的应用价值。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

小分子多肽在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的小分子多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

编码所述的小分子多肽的基因，其DNA序列如SEQ ID NO.2所示。

含有所述的小分子多肽的编码基因的DNA序列的载体。

所述的载体，将小分子多肽的DNA序列连接进PCMV-HA载体，构建出重组表达质粒。

有益效果：与现有技术相比，本发明利用生物工程技术，基因重组一段47个氨基酸多肽对应的DNA序列到PCMV-HA真核表达载体。经酶切和序列分析证明重组成功后，将此真核表达重组多肽转染到肿瘤细胞，免疫印迹证明多肽的蛋白表达，经试验证实该小分子多肽具有显著抑制肿瘤细胞增殖的作用，在制备抗肿瘤药物中的将具有广泛的应用。

附图说明

图1是PCMV-HA载体图；

图2是CCK8实验检测47aa多肽抑制OCI-Ly8细胞增殖结果图；

图3是CCK8实验检测47aa多肽抑制Raji细胞增殖结果图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如分子克隆实验指南(第三版，J.萨姆布鲁克等著，黄培堂等译，科学出版社，2002年)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件进行。

实施例1小分子多肽的制备