[发明专利]可用于制备VII型新城疫疫苗的病毒株及其编码基因

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程领域，特别是免疫学领域，具体涉及一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株及其编码基因。

背景技术

研究报告指出：新城疫(Newcastle disease，ND)是各型禽病中最常见的一种恶性传染病，自1926年新城疫被发现以来，已传播至世界上大部分国家，此新城疫在各地区的流行不大相同。

鸡新城疫，1926年首先发现于印度尼西亚，不久又在英国新城发现，之后世界各国均有流行记载。新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性传染病，1926年首次爆发于印度尼西亚和英国的新城，故名新城疫病毒(Alexander DJ，1982)。它属于副粘病毒科(Paramyxoviridae)，腮腺炎病毒属(Rubulavirus)家族的成员(Rima BK et al.，1995)，属于禽类第一型副黏液病毒。其新城疫病毒的基因组为一条单股负链RNA，包含约15kb碱基，六个主要结构蛋白：3’-NP-P-M-F-HN-L-5’。

近年来，由于禽类副黏液病毒(Avian Paramyxovirus，APMV)时常被发现于许多种类的家禽、信鸽等禽类间；当感染此种病毒时，经常对于禽鸟造成各种不同的临床症状，例如，造成禽类呼吸、消化和神经系统的障碍等。由于各类型新城疫病毒的毒性强弱差异大，所以新城疫发生率、致病症状、病变征候、及致死率等亦都随着病毒类型不同而明显差异。虽然轻微时病征不显着，然而严重时则会导致死亡，因而晚近已引起世界各国特别地关注、重视并且不断进行此类病原群相关的研究及调查。

根据感染能力和感染后所引起的临床症状的严重性差别，新城疫病毒可分为强毒(velogenic)、中毒(mesogenic)和弱毒(lentogenic)三类(AlexanderD J，1997)。NDV强毒株感染力很强，通常以引起强烈性感染为特征；而NDV弱毒株的感染力和致病力很弱，一般无急性感染病症，事实上，包括La Sota等在内的多株弱毒NDV通常在生产上被用做活毒疫苗。

然而，因为新城疫的强毒力型病毒感染的死亡率高，对养鸡业危害严重。尚无有效治疗药物，只能依靠严格消毒、隔离，活毒疫苗和灭活疫苗的协同使用预防接种。目前防止新城疫的疫苗主要使用LaSota和Hitchner B1两种弱毒株疫苗或其灭活毒株疫苗，并且这两株病毒作为疫苗毒株已经应用了几十年。LaSota和Hitchner B1两病毒株都属于基因II型，而当前流行亚洲地区的病毒株主要是基因VII型NDV。因此，上述两种疫苗不能在临床应用上提供坚强的免疫保护，此状况也可以解释了新城疫依旧在一些地区爆发流行的原因。

此外，基于现有疫苗质量问题、免疫接种方式方法、免疫程序、鸡场饲养管理水平、鸡群抗体水平良莠不齐的现状，使新城疫免疫失败屡见不鲜。可以当作一个好的疫苗候选的病毒株需同时具有毒力弱、和遗传稳定性好的特点，而目前国内外分离到的新城疫病毒普遍存在强毒株的裂解位点、效价低和容易发生变异等缺点。大部分新城疫病毒的F蛋白裂解位点序列为强毒特征，但对鸡的致病力较弱，推测这种毒力的差异可能由于病毒的复制能力的差异而引起。为解决这一难题，有赖于对本地区流行的毒株的流行特点、变异特点进行研究以及筛选分离出合适的优势疫苗的病毒株，以使新城疫的防控进一步具有针对性和有效性。

因此，各界莫不期待以及殷切期盼开发出一种能够解决免疫力反应低、感染力弱、防疫效果持续力弱等的传统技术的缺陷的Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株。

发明内容

有鉴于此，本发明人等经由潜心研究及寻找用于解决传统技术缺陷的各种可能方案，进而筛选出一种不但能够克服上述现有技术的缺陷，而且不会危害饲养环境及禽类健康、且具有能够有效提高宿主对新城疫病毒的免疫力反应、对宿主的感染力在安全范围内、产生抗体免疫持续力长等功效、以及能够制成具有长效防治新城疫效能的疫苗的新颖的适用于Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株，至此完成本发明。