[发明专利]一种短葶山麦冬甾体皂苷化合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种具有式Ⅰ结构的化合物或其药学上可接受的盐，

2.一种制备权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将短葶山麦冬地下部位粗提，然后大孔树脂吸附、反复萃取、硅胶柱层析、Spheladex LH-20柱层析、高压液相色谱仪分离，即得。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)称取短葶山麦冬地下部位，加入乙醇，回流提取，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，备用；

2)将药液过大孔树脂吸附,并用水或低浓度乙醇除杂，高浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，备用；

3)将步骤2)中所得药液用乙酸乙酯多次萃取，然后用正丁醇多次萃取，将萃取液分别浓缩至浸膏，分别获得乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物；

4)将步骤3)得到的正丁醇萃取物用硅胶柱色谱分离，用氯仿-甲醇进行梯度洗脱，收集I2至I8部分洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并相同部分，浓缩至干，备用；

5)将硅胶柱层析I2至I8部分分别用凝胶Sephadex LH-20进行柱层析，用氯仿-甲醇进行洗脱除杂，分别收集所得洗脱液，减压回收浓缩至干得II2至II8，备用；

6)将II7部分以RP-18为填料，用高压液相色谱仪分离进行纯化，即得。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中，乙醇的浓度为50-75％。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中，所用大孔树脂为D101型；低浓度乙醇的浓度为20-30％；高浓度乙醇的浓度为50-75％。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中，乙酸乙酯的用量与药液的体积比为1:1～3：1；正丁醇的用量与药液的体积比为1:1～3：1。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤4)中，氯仿和甲醇的体积比为10:1，9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，3:7，2:8；

所述步骤5)中，氯仿和甲醇的体积比为1-3：1-3；

所述步骤6)中将II7部分以RP-18为填料，用高压液相色谱仪分离纯化是以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱。

8.根据权利要求2-7任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)称取短葶山麦冬地下部位，加入药材重量体积6-10倍量的浓度为50-75％的乙醇，回流提取1-3次，每次提取1-3小时，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，备用；

2)将药液过大孔树脂吸附,分别用水和浓度为20-30％的乙醇除杂，用50-75％的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，备用；

3)将步骤2)中所得药液用乙酸乙酯萃取，然后再用正丁醇萃取，将萃取液分别浓缩，分别获得乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物；

4)将步骤3)得到的正丁醇萃取物上硅胶柱，用体积比为10:1，9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，3:7，2:8的氯仿-甲醇进行梯度洗脱，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并相同部分，浓缩至干，分别得到Ⅰ1-8，备用；

5)将硅胶柱层析I2至I8部分分别用凝胶Sephadex LH-20进行柱层析，用体积比为1-3：1-3的氯仿-甲醇的混合液进行洗脱除杂，分别收集所得洗脱液，减压回收浓缩至干得II2至II8，备用；

6)将其中的II7以RP-18为填料，用高压液相色谱仪分离纯化，梯度洗脱条件如下：0到10分钟，甲醇-水为流动相中，甲醇体积浓度为60％，水的浓度为40％；10到20分钟，甲醇的浓度匀速变为65％，水的浓度为35％；再于20到30分钟，甲醇的浓度匀速变为70％，水的浓度为30％，收集保留时间为19.6min的馏分，经过浓缩馏分，回收溶剂，过滤得到晶体。

9.含有权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。

10.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。