[发明专利]一种新的短葶山麦冬鲁斯可甾体皂苷类化合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及从短葶山麦冬地下部位中提取分离的一组五个鲁斯可甾体皂苷类新化合物、制备方法及在抗肿瘤方面的用途。

背景技术

短葶山麦冬为百合科(Lilaceae)山麦冬属(Liriope)植物短葶山麦冬Liriope musc ari(Decne)Baily的干燥块根，是《中国药典》一部“山麦冬”项下收载的常用中药。具有养阴润肺，益胃生津的功效，可用于肺燥干咳，阴虚痨嗽，喉痹咽痛，津伤口渴，内热消渴，心烦失眠，肠燥便秘”，广泛用于心血管系统、呼吸系统疾病及糖尿病等疾病的治疗。药理实验表明，短葶山麦冬药材可以显著延长小鼠存活时间、极显著增加小鼠的脾脏重量、显著增强小鼠的碳粒廓清作用。

前期研究表明，短葶山麦冬中主要含甾体皂苷类、萜类、酰胺生物碱类、脂肪酸类等化合物，其中甾体皂苷是其主要生物活性成分。药理作用表明，短葶山麦冬药材中分离所得的甾体皂苷类化合物DT-13为其主要活性成分，其能抑制肺癌、乳腺癌、黑色素瘤等肿瘤的生长和转移，并发现其通过与蛋白NMMHC IIA结合，调节肿瘤转移过程中的多种关键分子，进而抑制肿瘤。

长期以来，在市场上，尤其是在福建省泉州市，惠安，仙游等地将短葶山麦冬作为麦冬Ophiopogon japonicus的替代品使用。国内外学者对该植物化学成分研究报道甚少，仅有的文献大部分集中在发明人所在研究小组对其成分的研究上，经过大量的研究发明人意外的发现一类新的鲁斯可甾体皂苷类化合物。

发明内容

本发明的目的是提供从短葶山麦冬地下部位中分离出的5个鲁斯可甾体皂苷类新化合物。

本发明提供了一个具有通式Ⅰ结构的化合物或药学上可接受的盐：

式中：

R1为H、-CH₂OH或-CH₃；

R2为吡喃木糖；

R3为吡喃木糖、鼠李糖或岩藻糖。

注：式Ⅰ右侧的破折线是异构体的标志，可以为R型也可以为S型或R型和S型的混合物。

优选的，本发明所述化合物选自以下结构的化合物：

本发明进一步包括制备本发明所述化合物或药学上可接受的盐的方法，所述方法包括以下步骤：

1)称取粉碎的短葶山麦冬地下部位，加入乙醇，搅匀，回流提取，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，备用；

2)将药液直接用大孔树脂吸附,并用水和低浓度乙醇除杂，高浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，备用；

3)将(2)中所得药液用乙酸乙酯多次萃取，再用正丁醇多次萃取，将萃取液分别浓缩至浸膏，分别获得乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物；

4)将正丁醇萃取物进行硅胶柱色谱分离，用氯仿-甲醇进行梯度洗脱，收集I2至I8部分的洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并相同部分，浓缩至干，备用；

5)将硅胶柱层析I2至I8部分分别用凝胶Sephadex LH-20进行柱层析，用氯仿-甲醇进行洗脱除杂，分别收集所得洗脱液，减压回收浓缩至干得II2至II8，备用；

6)将II6部分以RP-18为填料，用高压液相色谱仪进行分离纯化，得式1化合物或式2化合物；将II7部分以RP-18为填料，用高压液相色谱仪进行分离纯化，得式3化合物、式4化合物或式5化合物。

其中，所述步骤1)：提取用的乙醇为50-70％的乙醇，其用量是药材重量的6-10倍体积。

其中，所述步骤2)：所用大孔树脂为D101型，除杂乙醇浓度为20％-30％，所得合并液为50％-75％洗脱部分。

其中，所述步骤3)中：乙酸乙酯的用量是药液的体积比为1:1～3：1；正丁醇的用量是药液的体积比为1:1～3：1。

其中，所述步骤(4)中：所述梯度洗脱，洗脱方式为氯仿-甲醇体积比为10:1，9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，3:7，2:8；

其中，所述步骤(6)中：

II6的纯化过程为：以甲醇-水为流动相，梯度洗脱条件如下：0到10分钟，甲醇-水为流动相中，甲醇体积浓度为60％，水的浓度为40％；10到20分钟，甲醇的浓度匀速变为70％，水的浓度为30％；20到30分钟，甲醇的浓度匀速变为80％，水的浓度为20％，根据化合物的保留时间不同，共收集到两个主要馏分，经过分别浓缩馏分，回收溶剂，得式1化合物或式2化合物；