[发明专利]一种胃功能检测用免疫层析试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫层析检测技术领域，具体涉及一种胃功能检测用免疫层析试剂盒及其制备方法。

背景技术

胃蛋白酶原始胃液中胃蛋白酶的无活性前体，由胃体的主细胞和黏液细胞分泌，大部分分泌到胃腔，少量可在血液中被检测到。根据其生化性质和免疫原性将其分成2个亚群，1-5组分的免疫原性相同，称为胃蛋白酶原I，主要由胃底腺的主细胞和黏液颈细胞分泌；组分6和7被称为胃蛋白酶原II，除由胃底腺的主细胞和黏液颈细胞分泌外，贲门腺和胃窦的幽门腺的黏液颈细胞以及十二指肠上段也能产生胃蛋白酶原II。血清和血浆中胃蛋白酶原I和胃蛋白酶原II比值的降低与胃体萎缩的严重程度呈正相关，中、重度萎缩性胃炎时，其比值为＜0.3，其胃癌的发病率显著增加，因此，联合测定胃蛋白酶原I核胃蛋白酶原II比值可起到早期胃癌风险提示的作用。另外，胃幽门螺旋杆菌是生存在人类胃粘膜的病原菌，是慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的重量致病因子之一，是人胃内唯一能够产生大量尿毒酶的细菌，因此检测胃幽门螺旋杆菌抗体对胃功能和胃癌发病率的判断具有指示性的作用。

目前对于胃蛋白酶原和幽门螺旋杆菌尿素酶抗体的主要检测的方法由酶联免疫吸附法、化学发光免疫测定和荧光免疫层析法。酶联免疫吸附法检测精确，能准确定量，具有很高的敏感性，但是检测样品需要加样、温浴、洗涤、显色、终止等步骤，操作程序繁琐，耗时长，样品从处理到得到结论需要至少40分钟，不适合大规模的体检筛查；样品检测需要洗板机和酶标仪，携带不便，因而不能在病人家庭或急救车上进行检测；另外，其敏感性、特异性不够高，对低浓度样品检测的准确度不高。而化学发光免疫测定，虽然精确度高，检测速度快，但检测需要昂贵的化学发光免疫分析仪，要求特定的分析室，且其试剂成本也较高，无法广泛用于较基层的意愿和医疗机构中。荧光免疫层析法相比酶联免疫吸附法和化学发光免疫测定，检测灵敏度高、准确度高、操作简便、成本低，因而使其在胃蛋白酶原和幽门螺旋杆菌尿素酶抗体的检测方面具有更大的产业价值，然而目前无论是采用何种检测方法，大多是对胃蛋白酶原I、胃蛋白酶原II和幽门螺旋杆菌尿素酶抗体进行单独检测，还没有实现对胃蛋白酶原I、胃蛋白酶原II和幽门螺旋杆菌尿素酶抗体三种物质的一步联合检测。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种灵敏度高、准确度高、操作简便、成本低的胃功能检测用试剂盒，实现对胃蛋白酶原I、胃蛋白酶原II和幽门螺旋杆菌尿素酶抗体三种成分的同时联合检测。

本发明的目的还在于提供一种胃功能检测用试剂盒的制备方法。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：

一种胃功能检测用试剂盒，包括塑料板、设置在塑料板上的玻璃纤维素膜、设置在玻璃纤维素膜上的硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上一端设有样本垫，对应的另一端设有吸水垫，所述玻璃纤维素膜上包被有量子点标记的胃蛋白酶原I抗体、量子点标记的胃蛋白酶原II抗体和量子点标记的幽门螺旋杆菌尿素酶抗原的混合物；所述硝酸纤维素膜上设置有检测线1、检测线2、检测线3和控制线，所述检测线1上包被有胃蛋白酶原I二抗，所述检测线2上包被有胃蛋白酶原II二抗，所述检测线3上包被有幽门螺旋杆菌尿素酶抗原，所述控制线上包被有羊抗鼠lgG。

所述玻璃纤维上包被的量子点标记的胃蛋白酶原I抗体、量子点标记的胃蛋白酶原II抗体和量子点标记的幽门螺旋杆菌尿素酶抗原的混合物中量子点标记的胃蛋白酶原I抗体、量子点标记的胃蛋白酶原II抗体和量子点标记的幽门螺旋杆菌尿素酶抗原的质量比为1：1：1。

所述量子点为硒化镉或硫化镉量子点。

所述硝酸纤维素膜上设置的检测线1与检测线2之间、检测线2与检测线3之间、检测线1与控制线之间的间隔均不小于5mm。

上述胃功能检测用试剂盒的制备方法，包括以下操作步骤：

1)原材料的制备：

A：制备玻璃纤维素膜：将量子点标记的胃蛋白酶原I抗体、量子点标记的胃蛋白酶原II抗体、量子点标记的幽门螺旋杆菌尿素酶抗原混合包被在玻璃纤维素膜上，干燥，备用；

B：制备硝酸纤维素膜：取硝酸纤维素膜，间隔划分出检测线1、检测线2、检测线3和控制线，然后将胃蛋白酶原I二抗、胃蛋白酶原II二抗、幽门螺旋杆菌尿素酶抗原、羊抗鼠lgG分别包被在硝酸纤维素膜的检测线1、检测线2、检测线3和控制线上，之后将包被后的硝酸纤维素膜放入封闭液中封闭，干燥，备用；