[发明专利]一种检测次氯酸的荧光探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种检测次氯酸的荧光探针，其特征在于，其结构式如下：

其中，结构式中的R为羟基。

2.一种权利要求1所述的检测次氯酸的荧光探针的制备方法，其特征在于，将占吨酮衍生物与劳森试剂反应得到目标产物，即为检测次氯酸的荧光探针，所述占吨酮衍生物为3-羟基-9H-占吨-9-酮。

3.如权利要求2所述的一种检测次氯酸的荧光探针的制备方法，其特征在于，其反应步骤为，将占吨酮衍生物与劳森试剂溶解在溶剂中，加热反应后得到目标产物，即为检测次氯酸的荧光探针。

4.如权利要求3所述的一种检测次氯酸的荧光探针的制备方法，其特征在于，加热温度至70-80℃，反应时间为1.5-2.5h；所述溶剂为无水甲苯。

5.如权利要求3所述的一种检测次氯酸的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述占吨酮衍生物、劳森试剂和溶剂的用量比例为0.17-0.19:0.2-0.21:4-5，g:g:mL。

6.如权利要求2所述的一种检测次氯酸的荧光探针的制备方法，其特征在于，所述目标产物的纯化方法为色谱分离；

所述色谱分离的洗脱剂是二氯甲烷和甲醇的体积比为20-25:1的混合液。

7.权利要求1所述的化合物在制备检测次氯酸的荧光探针中的用途。

8.一种检测次氯酸的方法，其特征在于，其步骤为：

(1)将权利要求1所述的检测次氯酸的荧光探针溶解在生理盐水、缓冲液或培养液中，配制成储备液储存待用；

(2)加入含有细胞组织的适当缓冲液中进行测试。

9.一种检测活细胞内次氯酸的方法，其特征在于，其步骤为：

(1)将含有权利要求1所述的检测次氯酸的荧光探针的缓冲溶液1-5μM加入培养好的细胞放于培养箱中孵育10-20分钟；

(2)将细胞用生理PBS缓冲液洗去多余的探针，然后进行双光子共聚焦显微成像，如果是检测内源性的物质，则是直接进行双光子共聚焦成像，如果是外加检测物的，则是加入检测物后，再次孵育10-15分钟，进行成像。