[发明专利]绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片及其使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片及其使用方法，属于医学免疫体外诊断领域，能够在很短时间内实现对生物样品中人绒毛膜促性腺激素β亚单位的定量检测，具有操作简单，灵敏度高，低成本的特点。

背景技术

人绒毛膜促性腺素(Human Chorionic Gonadotropin，hCG)是由胎盘合体滋养层细胞合成和分泌的糖蛋白激素，由α、β两个不同亚单位组成，α亚单位与垂体分泌的FSH（促卵泡激素）、LH（促黄体生成素）和TSH（促甲状腺激素）等的α亚单位结构相似，相互间能发生交叉反应。β亚单位与LH的β亚单位不同，特异性更强，成为检测中的首选靶点，总β-hCG可以在很大程度上替代总hCG的指示作用。hCG具有FSH和LH的功能，可以维持月经黄体的寿命，使月经黄体增大成为妊娠黄体；可以促进雄激素转化为雌激素，同时刺激孕酮形成；可吸附于滋养细胞表面，抑制植物凝集素对淋巴细胞的刺激作用，以免胚胎滋养层细胞被母体淋巴细胞攻击；具有类LH功能，在胎儿垂体分泌LH以前，刺激胎儿睾丸分泌睾酮促进男性性分化；还可促进性腺发育，对男性能刺激睾丸中间质细胞的活力，增加雄性激素（睾酮）的分泌；能与母体甲状腺细胞TSH受体结合，刺激甲状腺活性。hCG 的检查对早期妊娠诊断有重要意义，对异常妊娠诊断、滋养层肿瘤患者（卵巢和卵巢外绒毛癌）的诊断和跟踪、非滋养层肿瘤患者（卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、胃肠癌和睾丸癌）的诊断和跟踪以及21三体综合征的筛查等有一定价值。成熟女性因受精的卵子移动到子宫腔内着床后，形成胚胎，在发育成长为胎儿过程中，胎盘合体滋养层细胞产生大量的hCG，可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。当妊娠1～2.5周时，血清和尿中的hCG水平即可迅速升高，第8周孕期达到高峰，至孕期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期。血hCG检查是目前最早最准确测试是否怀孕的检查方式，一般是在性生活后8-10天可以通过抽血检查hCG来明确是否有怀孕。

目前，检测 β-hCG 的方法主要有酶联免疫分析法 (ELISA) 和化学发光免疫分析法 (CLIA)。 酶联免疫分析法由于方法间差异较大，导致结果不均一，且线性范围较窄，操作复杂，不适于做单人份或少量标本的检测。化学发光技术兴起于上个世纪80年代，是继酶联免疫技术和放免技术之后发展起来的新兴技术，具有高灵敏度、高特异性，方法简便、快速，标记结合物稳定，无放射性同位素损伤和污染等特点，目前得到了广泛的应用。

磁微粒免疫检测技术是利用高分子材料合成一定粒度大小的磁性固相微粒作载体，以物理吸附、化学偶联等方法包被上具有特异性亲和力的的抗体或抗原等各种免疫活性物质，具有分离速度快、效率高、可重复性好、操作简单、不影响被分离细胞或其他生物材料的生物学性状和功能等特点，在外加磁场作用下可定向运动，使某些特殊成分得以分离、浓集或纯化。

微流控盘片作为一种新型的分析检测平台，具有高通量、集成化、便携式、易操作、低成本等优点，已经在众多领域中得到了广泛的应用，尤其是在免疫分析领域已崭露头角。

免疫磁珠的生物微流控盘片是将磁颗粒技术，免疫分析集成到微流控芯片上的一种分析检测方法，目前这种综合性的检测方法的主要难点表现为：1) 液体在芯片内部微流动的智能控制，目前常采用的方法是在芯片内部设置多个微泵和微阀，使得微流控体系变得更加复杂化；2) 反应体系的混合不充分，导致反应不充分；3) 集成化程度不高，导致非特异性背景高。

发明内容

本发明目的在于提供了一种绒毛膜促性腺激素β亚单位微流控盘片及其使用方法；本发明采用简单的方法即可实现微流控盘片内部微流体的智慧控制，同时能够使反应液体得以充分混合，保证反应体系高效进行，可快速实现样品中 hCG 浓度的定量检测；具有操作简单，检测灵敏度高，结果准确可靠，重复性好，低成本的特点。

为了达到上述目的，本发明的技术方案是：