[发明专利]一种miR-638在急性髓系白血病化疗中的应用

说明书

技术领域

本发明属于分子肿瘤细胞生物学领域，涉及一种灵长类特异的非编码微小RNA——hsa-miR-638(以下称为miR-638)在急性髓系白血病化疗中的应用。

背景技术

微小RNA(microRNAs，miRNAs)是一类长约22个核苷酸(nt)的单链小分子RNA，主要通过抑制蛋白翻译或破坏靶基因转录本稳定性而调节转录后基因表达。随着越来越多的miRNAs在人类细胞中被发现，其在发育、细胞增殖和死亡过程等方面所发挥的广泛调控作用也被揭示。许多研究证明，miRNAs在不同的恶性肿瘤中有不同的表达谱，并揭示了多种miRNAs分子通过沉默癌细胞生长相关基因的表达，参与了癌细胞生长代谢的调控，间接地起着“促癌和抑癌基因”的作用。miRNAs表达水平在肿瘤发生前后存有较大差异，这种差异表达在肿瘤诊断、治疗疗效及预后评估中起着重要作用。恶性肿瘤是经济发达国家的主要死亡原因，在发展中国家则占据死亡原因的第二位。放化疗作为肿瘤的主要治疗方法之一，其疗效受肿瘤细胞放化疗敏感性影响。不同个体肿瘤的放化疗敏感性存在差异。目前随着众多学者对miRNAs研究的深入，其与肿瘤之间关系被揭示，与肿瘤放化疗敏感性之间的关系也逐渐清晰。

大量研究表明，miRNAs在转录后水平调节基因表达，调控肿瘤发生、发展、迁移和浸润，其在肿瘤诊断、治疗疗效及预后等方面的作用逐渐被发现。miR-638是一类与早期人胚发育相关的、灵长类特异表达的miRNAs。我们的前期研究表明：miR-638在正常的髓系血细胞发育过程中的表达呈现上调趋势，且在细胞系(或AML原代祖细胞)的体外诱导髓系分化过程中表达显著上调，提示miR-638可能是髓系造血的一个重要的调控因子。详细的分子机制和功能研究提示miR-638通过靶向调控其潜在的靶基因控制着髓系造血分化，为发展急性髓系白血病的诊断和治疗试剂提供了新的靶标。部分相关研究结果已经于2014年申请了国内专利(专利申请号：201410466367.2)。

发明内容

本发明的目的在于提供一种miR-638在急性髓系白血病化疗中的应用。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：一种miR-638在急性髓系白血病化疗中的应用，将miR-638应用于制备急性髓系白血病化疗的增敏药物。

优选地，miR-638与染色质粘连蛋白SMC1A基因3’-UTR区域直接结合应用于制备急性髓系白血病化疗的增敏药物。

优选地，利用常规的商品化质粒pMIR-ReportLuciferase载体，构建miR-638靶基因染色质粘连蛋白SMC1A基因的筛选系统。

一种miR-638商品化模拟物在急性髓系白血病化疗中的应用，将miR-638商品化模拟物应用于制备急性髓系白血病化疗的增敏药物。

优选地，miR-638商品化模拟物与染色质粘连蛋白SMC1A基因3’-UTR区域直接结合应用于制备急性髓系白血病化疗的增敏药物。

本发明与现有技术相比的有益效果是：

miR-638的过表达能增加急性髓系白血病细胞对化疗药物顺铂的敏感性，表现出更为严重的白血病细胞DNA损伤程度，增加急性髓系白血病化疗的治疗效果，减轻患者化疗的痛苦。

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步描述。

附图说明

图1为miR-638在白血病细胞系体外诱导分化过程中表达上调图。流式细胞术检测髓系分化指标(巨核系：CD41a；单核/巨噬细胞系：CD14；粒系：CD11b，A～C，上)表达和实时定量PCR检测(A～C，下)miR-638表达情况。每组实验重复三次，miR-638表达柱状图结果显示为“均值±SD”。#，p<0.0001。

图2为miR-638靶标基因SMC1A的证明图。A、RNAhybrid分析SMC1A的3’-UTR端可能的miR-638的靶向位点。B、双荧光素酶报告实验检测了转染不同质粒和模拟物后的HEK293T细胞的相对双荧光素酶活性。每个实验重复三次，相对荧光素酶活性柱状图结果显示为“均值±SD”。*，p<0.05。