[发明专利]一种蛹虫草静置发酵的生物反应器及其发酵方法有效
申请号: | 201610316379.6 | 申请日: | 2016-05-13 |
公开(公告)号: | CN105969653B | 公开(公告)日: | 2018-01-09 |
发明(设计)人: | 汤佳鹏;金柳函;孔婷 | 申请(专利权)人: | 南通大学 |
主分类号: | C12M1/24 | 分类号: | C12M1/24;C12M1/02;C12P19/40;C12R1/645 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所32237 | 代理人: | 胡建华 |
地址: | 226019*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 虫草 发酵 生物反应器 及其 方法 | ||
1.一种蛹虫草静置发酵的生物反应器,其特征在于,它包括设置于磁力搅拌恒温水浴锅内的广口玻璃容器(1),广口玻璃容器(1)底部设有倒置的不锈钢筛网(2),广口玻璃容器(1)底部、不锈钢筛网(2)内部设有磁力搅拌子(3),不锈钢筛网(2)上设置一层无菌琼脂凝胶层(4),广口玻璃容器(1)顶部包裹纱布(5);
其中,倒置的不锈钢筛网(2)的顶部平面具有网孔(6);
其中,所述的无菌琼脂凝胶层由含有2-20g/L的腺嘌呤的15-40g/L琼脂粉水溶液经高温蒸汽灭菌后,倒入6-12cm无菌培养皿中冷却制得。
2.根据权利要求1所述的蛹虫草静置发酵的生物反应器,其特征在于,所述的琼脂凝胶层(4)要完全覆盖住倒置的不锈钢筛网(2)的顶部平面。
3.根据权利要求1所述的蛹虫草静置发酵的生物反应器,其特征在于,所述的纱布(5)为6层。
4.根据权利要求1所述的蛹虫草静置发酵的生物反应器,其特征在于,所述的广口玻璃容器(1)为100-1000mL玻璃烧杯。
5.根据权利要求4所述的蛹虫草静置发酵的生物反应器,其特征在于,当所述的广口玻璃容器(1)为100mL时,配套使用Φ8mm×30mm聚四氟磁力搅拌子;当所述的广口玻璃容器(1)为500mL时,配套使用Φ8mm×50mm聚四氟磁力搅拌子;当所述的广口玻璃容器(1)为1000mL时,配套使用Φ9mm×70mm聚四氟磁力搅拌子。
6.根据权利要求4所述的蛹虫草静置发酵的生物反应器,其特征在于,当所述的广口玻璃容器(1)为100mL时,配套使用直径5cm、高度3cm、网孔10目的不锈钢筛网;当所述的广口玻璃容器(1)为500mL时,配套使用直径8cm、高度4cm、网孔10目的不锈钢筛网;当所述的广口玻璃容器(1)为1000mL时,配套使用倒置2层的直径12cm、高度5cm、网孔10目的不锈钢筛网。
7.利用权利要求1所述的生物反应器进行蛹虫草静置发酵的方法,其特征在于,它包括如下步骤:
1)广口玻璃容器(1)中,加入磁力搅拌子(3),并倒置不锈钢筛网(2),将发酵培养基倒入广口玻璃容器(1)中使得液面(7)高出不锈钢筛网(2)1-3cm,体系灭菌;
2)将蛹虫草从保藏斜面上刮入发酵培养基中22-30℃180-300转/分震荡培养3-5d得到种子液;
3)将步骤2)制得的种子液以5-20%v/v的接种量接入步骤1)所述的发酵培养基中,覆上无菌琼脂凝胶层(4),以完全盖住不锈钢筛网(2)的顶部平面,广口玻璃容器(1)顶部用无菌纱布封口;
4)将步骤3)的广口玻璃容器(1)置于磁力搅拌恒温水浴锅中搅拌培养,搅拌转速60-120转/分,温度设置为25-27℃,培养21-34d。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤2)中,所述的蛹虫草为Cordyceps militaris CICC 14014。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤1)或2)中,所述的发酵培养基配方为:葡萄糖30-50g/L,酵母膏6-12g/L,蛋白胨10-30g/L,磷酸二氢钾0.3-1.0g/L,磷酸氢二钾0.3-1.0g/L,硫酸镁0.3-2.0g/L,溶剂为水,用盐酸调pH值至5.0-7.0。
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