[发明专利]一种蛋白或多肽组合物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种组合物及其制备方法和用途。所述组合物中含有蛋白或多肽和寡聚透明质酸(寡聚HA)或其盐；其液体形式时，蛋白或多肽0.1‑100μg/ml，寡聚透明质酸或其盐1‑20％。

技术领域

本发明涉及生化领域，尤其涉及一种蛋白或多肽组合物及其制备方法和用途。

背景技术

1934年，Meyer等自牛眼玻璃体提取分离得到一种大分子多糖，命名为hyaluronicacid。透明质酸(hyaluronan，HA)是大分子直链糖胺多糖(glycosaminoglycan，GAG)，由重复的二糖单元组成，即D-葡糖醛酸(β1-3)与N-乙酰基-D-葡萄糖胺(β1—4)。HA广泛存在于生物体内，具有多种生物学活性，作为许多组织例如皮肤、腱、肌肉和软骨的细胞的机械支撑，是细胞间基质的主要组成部分，在组织的湿润和润滑中起着重要作用。

HA及各自的盐已经用作药物，特别是治疗关节病中，用作天然器官和组织的辅助物和/或替代物，特别是在眼科和美容手术中，并用于化妆品制剂中作为优良的皮肤填充剂和护肤保湿剂。还开发了用于整形外科、风湿病和皮肤病的透明质酸产品。

根据分子量的不同，可以将透明质酸分为高分子量透明质酸(高2×10⁶Da)，中等分子量透明质酸(0.5-2×10⁶Da)，低分子量透明质酸(10k-500k Da)以及寡聚透明质酸(HA-Oligo，10k Da)。不同分子量的透明质酸，其理化性质和应用领域有所不同。一般普通情况下不指明特定分子量时即指中等分子量透明质酸。体内组织损伤、炎症及肿瘤发生时，内源性的透明质酸酶可消化HA多聚体而产生低分子量透明质酸寡糖片段(hyaluronanoligosaccharides，o-HA)。这种寡聚透明质酸已可以在体外通过消化、降解过程而获得。

近年来，含生长因子创伤敷料(growth factors contained wound dressing，GFD)已经成为医用敷料领域发展的新亮点，生长因子的加入使敷料增加了促进创面愈合、提高创面愈合效果的功效。目前已有众多重组生长因子在加速慢性创面愈合或皮肤损伤修复过程中起到重要的作用，并在临床和化妆品领域进行应用，这些生长因子包括表皮细胞生长因子(EGF)、纤维细胞生长因子(FGF)、角质细胞生长因子(KGF-2)、血小板源性生长因子(PDGF)等。

但蛋白质或多肽的结构决定了其不稳定性。蛋白质分子内部的化学键的形成或断裂引起的水解、氧化、消旋，以及其高级结构的物理转变包括变性、聚集、沉淀、吸附等都会影响甚至致使蛋白生理活性丧失。所以，如何对蛋白质或含蛋白组合物的活性保护成为其实际应用中的重要问题。目前，对蛋白常用的保护方法有冻干固化、选择温和的蛋白保存或处理条件、选择添加适宜的蛋白质稳定剂，它们通常是一些多羟基化合物，如海藻糖、乳糖、蔗糖、葡萄糖、右旋糖酐、甘露醇和甘油等。

透明质酸是有等摩尔的氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸双糖单位组成的直链多糖，透明质酸在水溶液中分子内的氢键令其形成螺旋结构，当浓度较高时可以形成网状结构，同时具有凝胶的弹性和液体的粘性这一双重特性，这种特性赋予其具有广泛的生理功能及应用前景。

Zhang等的研究显示，胰激肽原酶(PKase)在冻干时加入透明质酸或者透明质酸与海藻糖后，明显增加了PKase冻干品的储藏与复溶的稳定性。但寡聚透明质酸及其盐作为蛋白保护剂的研究和应用未见任何报道。

发明内容

本发明旨在提供一种蛋白或多肽的稳定的组合物。

在本发明的第一方面，提供了一种组合物，其中含有蛋白或多肽和寡聚透明质酸或其盐；其液体形式时，蛋白或多肽浓度为0.1-100μg/ml；以组合物的总体积计，寡聚透明质酸或其盐浓度为1-20％(w/v)。

在另一优选例中，所述寡聚透明质酸或其盐浓度为5-20％(w/v)，更优选为5-15％(w/v)。