[发明专利]一种人干细胞来源的生物美容原料的制备方法及其产品有效
申请号: | 201610303514.3 | 申请日: | 2016-05-11 |
公开(公告)号: | CN105769740B | 公开(公告)日: | 2019-03-19 |
发明(设计)人: | 陈建勋;黄启明;廖文敏 | 申请(专利权)人: | 紫程瑞生会(北京)生物技术发展有限公司 |
主分类号: | A61K38/19 | 分类号: | A61K38/19;A61K8/98;A61K8/64;A61Q19/00;A61Q19/02;A61Q19/08 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100176 北京市北京经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 干细胞 来源 生物 美容 原料 制备 方法 及其 产品 | ||
1.一种人干细胞来源的生物美容原料的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤,
(1)通过培养人干细胞获得干细胞和培养液;
(2)将干细胞裂解,加入到培养液获得蛋白悬液;
(3)将蛋白悬液经超浓缩后制备成浓缩液;
任选地,包括如下步骤,
(4)将浓缩液制备成人干细胞精华液;
任选地,包括如下步骤,
(5)将所述人干细胞精华液,经冷冻干燥后制备成冻干粉;其可长期在-80℃超低温冰箱保存;
其中,所述步骤(1)中使用MSC无血清培养基,其含0.1-200μg/ml氢化可地松、1-500μg/ml抗坏血酸和1-1000μg/ml人胰岛素;
所述浓缩液、人干细胞精华液或所述冻干粉可为皮肤再生修复的生物美容原料;
其中,所述人干细胞培养液、含人干细胞裂解液的培养液或其浓缩液均富含如下细胞生长因子:表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、类胰岛素生长因子1(insulin-like grouthfactors-1,IGF-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血小板衍生生长因子(Platelet derived growth factor,PDGF)和干细胞生长因子(stemcells factor,SCF),以及细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)和中性粒细胞胞浆因子2(neutrophil cytosolic factor 2,NCF-2);
所述人干细胞培养液含表皮生长因子含量超过10000pg/ml,碱性成纤维生长因子含量超过10000pg/ml,类胰岛素生长因子含量超过4000pg/ml,血管内皮生长因子含量超过4000pg/ml,血小板衍生生长因子含量超过7000pg/ml和干细胞生长因子含量超过2000pg/ml;以及细胞间粘附分子-1含量超过1000pg/ml和中性粒细胞胞浆因子2含量超过2000pg/ml。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述含人干细胞裂解液的培养液中表皮生长因子含量超过15ng/ml,碱性成纤维生长因子含量超过15ng/ml,类胰岛素生长因子含量超过6ng/ml,血管内皮生长因子含量超过8ng/ml,血小板衍生生长因子含量超过9ng/ml和干细胞生长因子含量超过5ng/ml;以及细胞间粘附分子-1含量超过3ng/ml和中性粒细胞胞浆因子2含量超过5ng/ml。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,经酶联免疫吸附测定ELISA试剂盒检测,所述人干细胞培养液、含人干细胞裂解液的培养液及其浓缩液富含细胞生长因子;
其中,所述人干细胞培养液含表皮生长因子含量超过10000pg/ml,碱性成纤维生长因子含量超过10000pg/ml,类胰岛素生长因子含量超过4000pg/ml,血管内皮生长因子含量超过4000pg/ml,血小板衍生生长因子含量超过7000pg/ml和干细胞生长因子含量超过2000pg/ml;以及细胞间粘附分子-1含量超过1000pg/ml和中性粒细胞胞浆因子2含量超过2000pg/ml,或/和,所述含人干细胞裂解液的培养液中表皮生长因子含量超过15ng/ml,碱性成纤维生长因子含量超过15ng/ml,类胰岛素生长因子含量超过6ng/ml,血管内皮生长因子含量超过8ng/ml,血小板衍生生长因子含量超过9ng/ml和干细胞生长因子含量超过5ng/ml;以及细胞间粘附分子-1含量超过3ng/ml和中性粒细胞胞浆因子2含量超过5ng/ml,
或/和,所述浓缩液中表皮生长因子含量超过40ng/ml,碱性成纤维生长因子含量超过40ng/ml,类胰岛素生长因子含量超过10ng/ml,血管内皮生长因子含量超过20ng/ml,血小板衍生生长因子含量超过25ng/ml和干细胞生长因子含量超过10ng/ml,以及细胞间粘附分子-1含量超过6ng/ml和中性粒细胞胞浆因子2含量超过10ng/ml。
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