[发明专利]一种含有硅藻土的微生物土壤杀虫剂制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种农用微生物制剂技术领域，特别是涉及一种含有硅藻土的微生物土壤杀虫剂制备方法。

背景技术

由于人们不合理的过度施用化肥、农药、杀虫剂等耕作方式，使土壤退化非常严重。主要表现为土壤硬化、盐碱化、酸化、元素失衡、化学污染、有机质流失和动植物区系的退化等，严重制约了土地生产力的发展。

硅藻土是一种硅质岩石，主要分布在中国、美国、丹麦、法国、苏联、罗马尼亚等国，是一种生物成因的硅质沉积岩，它主要由古代硅藻的遗骸所组成。其化学成分以SiO2为主，可用SiO2·nH2O表示，具有很强的吸水性，易磨成粉末，硅藻土粉末每个细微的颗粒都带有非常锐利的边缘，与昆虫接触时会附着在昆虫表面，划伤昆虫体表，并吸收昆虫体表的蜡质层及体内的水分，导致昆虫因失水而死，从而达到杀虫的目的，为机械物理杀虫方式，昆虫永远不会产生抗药性，且对人及家畜无害。

植物乳杆菌是乳酸菌的一种，是一类革兰氏阳性、不产芽孢、厌氧生长的细菌，此菌与别的乳酸菌的区别在于此菌的活菌数比较高，能大量的产生乳酸，能够抑制有害菌的生长，而且其产出的酸性物质能降解土壤中的重金属。

酿酒酵母是单细胞微生物，属于真菌类，耐酸性强，是兼性厌氧菌，能消耗肠道内的氧气造成厌氧环境，并代谢产生乳酸等有机酸，从而有利于乳酸菌等有益菌的生长，同时，酵母对多种病原微生物的具有很好的拮抗作用，抑制土壤中的真菌、细菌、链刀菌等各种病菌，抗重茬、减轻作物生长期病害发生。

哈茨木霉属于半知菌亚门，丝孢纲、丝孢目，粘孢菌类，是一类普遍存在的真菌，它通过产生抗菌素、重寄生作用、溶菌作用、竞争作用等，可有效地抑制多种土壤中病原微生物，据统计，它至少对18个属29种病原真菌在体外或体内表现有拮抗作用，哈茨木霉及其发酵产物能提高作物相关酶活性，促进植物对氮、磷、钾的吸收；优化土壤的微生物环境，促进植物生长。

发明内容

针对上述问题中存在的不足之处，本发明提供一种含有硅藻土的微生物土壤杀虫剂制备方法，使其生成的生物有机肥中所含有的微生物在土壤中大量增殖，在其增殖及代谢过程中加速了土壤养分的转化，提高了肥料利用率，同时抑制了多种病原菌的生长。

为了解决上述问题，本发明提供一种含有硅藻土的微生物土壤杀虫剂制备方法，其中，包括以下步骤：

S10、一级菌种制备；

S20、二级菌种制备；

S30、三级菌种制备；

S40、生物有机肥发酵。

优选的，在所述步骤S10中，还包括以下步骤：

S101、植物乳杆菌一级菌种的制备：在500ml滴流瓶装液体培养基400ml，无菌接入植物乳杆菌试管菌种，28℃下静止培养48h后即为植物乳杆菌一级菌种；

S102、酿酒酵母一级菌种的制备：在500ml滴流瓶装液体培养基400ml，无菌接入酿酒酵母试管菌种，28℃下静止培养48h后即为酿酒酵母一级菌种；

S103、哈茨木霉一级菌种的制备：在500ml三角瓶装液体培养基150ml，无菌接入哈茨木霉试管菌种，在摇床中培养，条件为28℃、120r/min培养48h后即为哈茨木霉一级菌种。

优选的，在所述步骤S20中，还包括以下步骤：

S201、植物乳杆菌二级菌种的制备：在500ml滴流瓶装液体培养基360ml，无菌接入植物乳杆菌一级菌种40ml，在28℃下静止培养48h后即为植物乳杆菌二级菌种；

S202、酿酒酵母二级菌种的制备：在500ml滴流瓶装液体培养基360ml，无菌接入酿酒酵母一级菌种40ml，在28℃下静止培养48h后即为酿酒酵母二级菌种；

S203、哈茨木霉二级菌种的制备：在500ml三角瓶装液体培养基130ml，无菌接入哈茨木霉一级菌种20ml，在摇床中培养，条件为28℃、120r/min培养48h后即为哈茨木霉二级菌种。

优选的，在所述步骤S30中，还包括以下步骤：

S301、植物乳杆菌与酿酒酵母复合固体菌种的制备：1000千克固体培养基接种30千克植物乳杆菌二级菌种和30千克酿酒酵母二级菌种，调节发酵料含水量在50％左右，在28℃下密闭发酵15天后即为植物乳杆菌和酿酒酵母复合固体菌种；

S302、植物乳杆菌与酿酒酵母复合液体菌种的制备：1000L液体培养基接种20千克植物乳杆菌二级菌种和20千克酿酒酵母二级菌种，在28℃下厌氧静止发酵15天即为植物乳杆菌和酿酒酵母复合液体菌种；