[发明专利]一种铜绿假单胞菌菌株及其应用

说明书

本发明公开了一种铜绿假单胞菌菌株及其应用，所述铜绿假单胞菌菌株保藏编号为：CGMCC No.11776。本发明是从烟草根部土壤中分离得到的一株高效降解卵菌杀菌剂—代森锰锌的铜绿假单胞菌，实验表明该菌能够在LB培养基中利用代森锰锌作为唯一碳源和能源而生长，并使代森锰锌降解；在添加外源营养物的液体培养条件下，该菌48h能够将混入培养基中5mg/L的高浓度代森锰锌降解90％以上，并且在较宽的pH范围内均有较好的降解效果；该菌可以用于水体及表面残留的代森锰锌的生物降解，弥补了目前利用铜绿假单胞菌降解代森锰锌农药残留的技术空白。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一种铜绿假单胞菌菌株及其应用。

背景技术

化学农药具有适用范围广、防治对象多、生产成本低、防治效果好以及经济效益高等优点，其广泛适用极大地促进了现代农业的发展，提高了农业生产的劳动效率和机械化程度。但是不可避免地，大量使用农药杀伤昆虫天敌和有益微生物、使有害生物产生抗性、造成人、畜中毒、易对植物产生药害等问题，进入环境中的化学农药，一部分可通过阳光照射、土壤中微生物等的作用，而逐步降解失效；另一部分最终会通过“食物链”的作用，进入人体，对人造成长期危害。各类化学农药目前已广泛进入全球空气及大气沉降物、水体、土壤、底泥级生物体等自然环境中，成为环境中无所不在的污染物，因此探索对农药残留进行有效降解的方法成为研究人员长期努力的一个重要研究方向。而在该领域研究中，近年来广泛兴起的使用微生物对农药残留进行生物降解成为热点领域，通过微生物作用将农药大分子分解成小分子化合物，并使其丧失活性。由于微生物个体小、繁殖迅速、比表面大等特点。它们较之其它生物更易适应环境，并可通过自然突变产生新菌种，产生新的酶系统，具有新的代谢功能，从而可参与对人工新合成化合物的降解与转化作用，因此微生物对降解农药残留具有巨大潜力。假单胞菌科，专性需氧的革兰氏染色阴性无芽胞、无荚膜杆菌，呈杆状或略弯，菌体大小(0.5～1)×(1.5～4)微米，具端鞭毛，能运动。有些株产生荧光色素或(和)红、蓝、黄、绿等水溶性色素，不发酵糖类。大多数菌的适温为30℃。DNA中的G+C克分子含量为58～70％。

发明内容

本发明的目的在于提供一种铜绿假单胞菌菌株及其应用，旨在解决降解代森锰锌残留的问题，提供一种高效降解代森锰锌的微生物菌种,该菌能高效降解代森锰锌，可以用于去除烟叶中代森锰锌残留的微生物降解技术。

本发明是这样实现的，一种铜绿假单胞菌菌株，所述铜绿假单胞菌菌株保藏编号为：CGMCC No.11776。

本发明的另一目的在于提供一种所述的铜绿假单胞菌菌株的培养方法，所述培养方法包括：将铜绿假单胞菌菌体接种到直径60毫米平皿培养基上，在30-37℃，平皿培养基上生长3-5天；

解剖刀刮取菌体，接入液体培养基中，2个培养皿刮取的菌丝接种到100ml培养液中，于30-37℃，240rmp/min转速条件下振荡培养3-5天，获得包含其分泌的胞外降解酶的培养液，为菌丝及菌液的混合菌剂。

进一步，所述平皿培养基组成为：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl10g，琼脂粉15g，蒸馏水1000ml，pH7.5。

进一步，所述液体培养基组成为：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl10g，蒸馏水1000ml，pH7.5。

本发明的另一目的在于提供一种所述铜绿假单胞菌菌株在降解代森锰锌农药残留的应用。

进一步，所述应用将经过培养的铜绿假单胞菌菌株的培养液100ml中，加入浓度5-10mg/L的代森锰锌农药，于37℃，转速240rmp/min，摇床震荡培养，培养时间48小时以上。