[发明专利]一种基于疏水柱的乌司他丁纯化方法

权利要求书

1.一种基于疏水柱的乌司他丁纯化方法，其特征在于，该方法包括：将乌司他丁粗品经过前处理，通过疏水柱层析进行纯化，洗脱液超滤，即得乌司他丁。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的疏水柱层析包括以下步骤：

1)前处理：将乌司他丁粗品溶解在水中，以质量g/体积ml计，乌司他丁∶水为1∶2，再用硅藻土过滤，收集滤液，加入ZnCl₂使其终浓度为150mmol/L，用预冷的95％乙醇沉淀，用量以体积ml/ml比计，样品溶解液体积∶95％乙醇体积为1∶1.1，搅拌30min，板框过滤，取上清液，调电导50～55ms/cm，冰醋酸调pH4.0；样品溶解液体积∶95％乙醇体积为1∶2.3，搅拌30min，板框过滤，取沉淀物；沉淀物溶解于3倍体积的水；

2)上样及洗涤：用pH3.5～4.5，1.5～2.0mol/L(NH₄)₂SO₄－0.05～0.15mol/L醋酸缓冲液平衡层析柱，上样，上样溶液的蛋白浓度为25～30mg/mL胶，用pH3.5～4.5，1.5～2.0mol/L(NH₄)₂SO₄－0.05～0.15mol/L醋酸缓冲液洗涤；

3)洗脱：用pH4.0～6.0、0.08mol/L磷酸盐缓冲液－0.4mol/L氯化钠溶液进行洗脱，洗脱液用超滤膜超滤，得纯化的乌司他丁原料药。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的疏水柱层析的层析介质选自：PhenylBio-sepFF、PhenylBio-sepHP和ButylBio-sepHP中的一种。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的洗涤液为pH值4.0的1.5mol/L(NH₄)₂SO₄－0.1mol/L醋酸缓冲液。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的洗脱液pH值为5.5。

6.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的超滤膜包括分子量5000～3万的超滤膜。