[发明专利]一种用于解痉镇痛的益生菌发酵中药组合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及芍药、甘草经益生菌发酵后制得的发酵组合物以及该发酵组合物的应用，属于生物发酵技术领域。

技术背景

芍药甘草汤是《伤寒论》名方，由甘草和白芍两味中药组成，芍药甘草汤主要治疗疼痛性、痉挛性疾病。骨骼肌的痉挛主要表现在四肢肌肉的抽筋疼痛，且以阵发性、痉挛性、历时短为特征，尤其在负重的下肢更为明显，此即仲景所谓“脚挛急”。现代应用主要是以骨骼肌、韧带的痉挛、抽掣样疼痛为特征的疾病。如腓肠肌痉挛，肌肉痛性痉挛综合征；以内脏平滑肌绞痛、剧烈痉挛等为特征的疾病，如胆绞痛、肾绞痛、胃痉挛、胃扭转、肠粘连、胃及十二指肠溃疡、萎缩性胃炎、支气管哮喘、百日咳及顽固性咳嗽、溃疡性结肠炎、晚期肝癌疼痛、痛经。对于子宫收缩导致的先兆流产，本方可缓解子宫痉挛，对避免流产有显效。综上所述，芍药甘草汤具有解痉、镇痛、镇静、抗炎、抗溃疡等综合作用。

现代生物学和药理学研究证明，芍药中含有多种物质，主要成分是芍药苷，挥发油、氨基酸等成分，其中芍药苷含量高达3.1%，其对试验家兔的离体肠管和大鼠的胃及子宫的平滑肌有降低肌胀力和抑制运动的作用。另外,对中枢神经系统有抑制作用，具有显著的解痉、镇痛的作用。

药代动力学表明，芍药苷经过肠道菌群作用后，产生四种新的代谢产物。普通大鼠口服芍药苷后用酶联免疫法测定血浆中芍药苷的含量，普通大鼠口服15分钟后，血浆中芍药苷快速达到Cmax，然后开始减少，在240分钟时为0.7ng／mL，而无菌大鼠在达峰后并未减少，到240分钟时，仍维持在25ng／mL水平上。说明芍药苷肠道内吸收很少，生物利用度很低，主要通过肠道菌群的代谢产物PM而发挥作用。

甘草的主要成分是三萜类、黄酮类、及甘草多糖类化合物等三大类。三萜类含有甘草酸、甘草酸盐、甘草次酸等成分，黄酮类含有甘草黄碱酮、异甘草黄酮、甘草素等。甘草中以甘草次酸含量为最大约为6%~14%，甘草的药理作用与含有的甘草次酸密切相关。甘草对因组织胺形成的实验性溃疡有明显的保护作用，具有肾上腺皮质样作用。现代动力学研究表明，甘草酸、甘草次酸口服后大部分以甘草次酸的形式吸收，一部分随粪便排除。健康人口服甘草酸，血液中未见甘草酸，而甘草次酸含量很高，并于1~4小时、10~12小时出现两个高峰，第一高峰为肠道菌群水解甘草酸所致，甘草次酸脂溶性强，易通过肠壁进入血液循环而发挥作用，因此，人体内的肠道菌群对于药物的代谢、吸收起着重要的作用。

鉴于芍药甘草汤的广泛的临床应用效果，推动了对芍药甘草汤的药物成分、工艺制剂的研究。例如，中国专利CN103330758A，公开了一种芍药甘草汤配方颗粒的制备方法，包括由1：1的芍药和甘草，通过加水共同煎煮1~3次，每次提取1~2小时，浓缩喷雾干燥，制粒过筛的方法制得。另外，中国专利：02109466.7，提到了从甘草中提取药物活性物质甘草次酸和从芍药中提取活性物质芍药苷并取各自的有效量与可药用的载体制成药物。具体包括酸沉、结晶、柱层析等过程。中国专利ZL-02156681.x公开了白芍甘草以一定比例混合，乙醇回流提取后再上大孔树脂提取有效成分白芍总苷、甘草总黄酮、甘草三萜酸的方法，中国专利20061014433307公开了芍药甘草汤在肠易激综合征的医药新用途。

上述这些方法都是通过酸处理，水提或者有机溶剂提取有效成分、通过柱层析精制有效成分，这些工艺特点是传统的生产办法，只是把药材中原有的成分进行提取，并没有将真正起作用的活性成分进行转化，获得较高的生物学活性的成分。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种用于解痉镇痛的益生菌发酵中药组合物，该组合物是由益生菌发酵白芍及炙甘草后，经过提取、并添加医药上可接受的添加剂所得到的芍药甘草发酵组合物。此发酵组合物包括白芍、炙甘草经过益生菌转化代谢后的药物组合物。该组合物按以下方法制得：

A.取白芍、炙甘草粉碎，过40目筛，加入药材重量8倍的水，浸泡1.0小时，调pH值为7.0，115℃灭菌50分钟；

B.温度降至39℃时，接入预培养好的一种或者以上乳杆菌菌液、酵母菌菌液、双歧杆菌菌液，同时或者不同时间接种，每株菌接种量为体积比1%，32~37℃培养72~96小时，结束发酵，得发酵液；

将发酵液离心，离心上清液备用。药渣加入8倍量的65%乙醇，加热回流提取1小时，滤过，滤液减压回收乙醇，醇提液与离心上清液合并，继续减压浓缩至60℃下相对密度1.01～1.05，得芍药甘草发酵提取液；