[发明专利]一种通过液相色谱法检测荷叶中荷叶碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及实验室检测领域，特别是一种通过液相色谱法检测荷叶中荷叶碱的方法。

背景技术

2015年药典记录了荷叶中的荷叶碱的提取方法：取本品粗粉约0.5g，精密称定，置 具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流2.5小时，放冷，再称定重量， 用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中，加水至刻 度，摇匀，即得。

液相色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈一水一三乙胺冰醋 酸(27：70.6：1.6：0.78)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按荷叶碱峰计算应不 低于2000。

药典的方法测试时间长达数小时，萃取和检测过程复杂，用时长。

发明内容

本发明的目的是提供一种通过液相色谱法检测荷叶中荷叶碱的方法，该方法采用超声 萃取法萃取荷叶碱并采用液相色谱法对荷叶碱进行检测，检测精度高，对萃取和分析操作 难度低。

本发明提供的技术方案为：一种通过液相色谱法检测荷叶中荷叶碱的方法，包括以下 步骤：

步骤1：将荷叶粉碎后，过筛，；

步骤2：将荷叶粉与纳米二氧化硅混合后研磨，荷叶粉和纳米二氧化硅的重量比为 19:1；

步骤3：将步骤2得到的混合物与萃取溶剂混合，萃取溶剂为1重量份的醋酸和4重 量份的甲醇以及5重量份的乙醇混合而成，混合物与萃取溶剂的重量比为1:9；

步骤4：将步骤3的混合物加热到50-55℃后，将容纳有混合物的容器置入超声波清 洗器中进行萃取得到萃取混合物；萃取时间为30-35min；

步骤5：将步骤4得到的萃取混合物过滤后用步骤3中所述的组分的萃取剂稀释，将 稀释后的容易进行液相色谱法分析，测定荷叶碱的含量；

液相色谱法的参数为：

a)仪器：液相色谱仪

b)色谱柱C₁₈色谱柱，5μm4.6×150mm

c)柱温：40℃

d)流速：0.5mL/min

e)流动相：乙腈-水；乙腈和水的体积比为30:70

f)检测波长：270nm。

在上述的通过液相色谱法检测荷叶中荷叶碱的方法中，所述的超声清洗器的超声频率 为200KHz-300KHz

本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：

本发明的检测方法操作简单，萃取效果与药典方法的精度一致，重复性好，样品用量 少，提取时间短。

在本发明中，在荷叶中添加纳米二氧化硅可以提高超声萃取过程中的萃取效果。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发 明的任何限制。

实施例1：

一种通过液相色谱法检测荷叶中荷叶碱的方法，包括以下步骤：

步骤1：将荷叶粉碎后，过筛；

步骤2：将荷叶粉与纳米二氧化硅混合后研磨，荷叶粉和纳米二氧化硅的重量比为 19:1；

步骤3：将步骤2得到的混合物与萃取溶剂混合，萃取溶剂为1重量份的醋酸和4重 量份的甲醇以及5重量份的乙醇混合而成，混合物与萃取溶剂的重量比为1:9；

步骤4：将步骤3的混合物加热到:52℃后，将容纳有混合物的容器置入超声波清洗 器中进行萃取得到萃取混合物；萃取时间为33min；超声频率为250KHz。

步骤5：将步骤4得到的萃取混合物过滤后取1ml用步骤3中所述的组分的萃取剂稀 释至50ml，将稀释后的容易进行液相色谱法分析，测定荷叶碱的含量；

液相色谱法的参数为：

a)仪器：液相色谱仪

b)色谱柱C₁₈色谱柱，5μm4.6×150mm，即碳18色谱柱，直径4.6mm，长度150mm， 粒径5微米。

c)柱温：40℃

d)流速：0.5mL/min

e)流动相：乙腈-水；乙腈和水的体积比为30:70

f)检测波长：270nm。

实施例1的检测方法的精确度测试