[发明专利]一种酸性木聚糖酶TLXYN10B及其基因和应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种酸性木聚糖酶TLXYN10B及其基因和应用。

背景技术

纤维素、半纤维素和木质素等是植物细胞壁的主要组成成分。纤维素大约占细胞干重的40～45％，是由葡萄糖通过β-1,4-糖苷键连接而成的线状结构分子。木质素约占细胞干重的15～25％，是一种复杂酚类聚合物。半纤维素约占细胞干重的30～35％，是继纤维素之后最丰富的可再生生物资源。半纤维素包括木聚糖，甘露聚糖，半乳聚糖等等，完全降解半纤维素举要多种酶的协同作用，其中木聚糖酶是一种切割β-1,4-糖苷键的主要酶类(Collinsetal.FEMSMicrobiologyReviews.2005,29:3-23.)。在食品，饲料和纸浆工业等方面有广阔的应用前景。

在啤酒酿造过程中，麦芽中的木聚糖造成啤酒过滤困难、堵塞过滤膜，增加了啤酒的生产成本和品质，采用酸性木聚糖酶和木聚糖酶协同作用，可以解决以上问题。在饲料制粒时，热稳定性优良的木聚糖酶可以较少的损失酶活，并在进食过程中辅助消化提高营养；在纸浆漂白时，木聚糖酶可以替代部分有机氯化物，从而减少环境污染。

由于不同工业对木聚糖酶性质需求不同，因此，获得新型具有优良特性木聚糖酶的研究仍具有重大意义。酸性木聚糖酶的产生、纯化、性质、酸性特征的结构基础及其在饲料加工、酿酒工业、果汁加工、以及能源等领域的应用正在不断深入。本发明克隆和分离的酸性嗜热木聚糖酶pH稳定性较好，对于工业生产中的酸性环境有一定的抵抗能力，可以更好的应用于饲料、酿酒和造纸工业。本发明中的木聚糖酶在pH3-6下均具有较高酶活力，具有优良的pH稳定性，在pH3～9之间保持稳定，表现出较高的木聚糖酶活性，并且对地衣多糖，CMCNa有一定的降解能力，在饲料，啤酒，造纸等工业中，具有一定的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种能高效应用的酸性木聚糖酶。

本发明的再一目的是提供编码上述酸性木聚糖酶的基因。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的重组载体。

本发明的另一目的是提供包含上述基因的重组菌株。

本发明的另一目的是提供一种制备上述酸性木聚糖酶的基因工程方法。

本发明的另一目的提供上述酸性木聚糖酶的应用。

本发明从蓝状菌(Talaromycesleycettanus)中分离得到一种新的酸性木聚糖酶TlXyn10B。

本发明提供了一种酸性木聚糖酶TlXyn10B，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。

SEQIDNO.1：

MVRLSAGLIVLPLVSAAAVDLQSRQAAQSINTLIQAKGKKYWGTCADEGRLTENSQNPAIAKADFGQVTPENSMKWDATEPSQGQFNFAQADWLVNWAQQNGKLIRGHNLVWHSQLPSWVCGITDKTALTNAMTNHITTLVSRYKGKIYAWDVVNEPFNEDGSLRQTCFYNVIGPDYIKIAFQTARAADPNAKLYVNDYNLDSASYAKTTGVANQVKQWIAQGVPIDGIGSESHLSAGAGAGVPAALQVLANSGVSEVAITELDIAQASSTDYDNVAQACLNVAKCVGITSWGISDKDSWRSSENPDLFDSNYQPKAAYNALVTLLGGSSGSGSGSGSGSGSGSGSGSGSGSGQAQHWGQCGGEGWTGPTSCVSPYTCQYQNQWYSQCL

其中，该酶包括389个氨基酸，N端16个氨基酸为其信号肽序列“MVRLSAGLIVLPLVSA”(SEQIDNO.3)。

因此，成熟的酸性木聚糖酶TlXyn10B的理论分子量为21.9kDa，其氨基酸序列如SEQIDNO.2所示：