[发明专利]一种测定琥珀酸曲格列汀原料中有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体涉及一种测定曲格列汀原料中有关物质的方法。

背景技术

在抗糖尿病药物中，口服给药的小分子化合物DPP-IV抑制剂研究最为活跃。DPP-IV是体内的一种酶，能够引发肠促胰岛素，即胰葡萄糖素样肽-1和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽的失活，而这2种肠降胰岛素在血糖调节中发挥着重要作用。抑制DPP-IV能够增加血糖水平依赖性胰岛素分泌，从而控制血糖水平。

DPP-IV抑制剂类药物被命名为“列汀类”，此类药物共有17个，其中的曲格列汀由武田制药开发，于2014年首次在日本获批上市，是一种超长效的DPP-IV抑制剂，每周只需要口服一次，可产生持续的DPP-IV抑制作用，不仅降糖效果理想，同时具有不增加体重和不会引起低血糖反应等优越性。曲格列汀(Trelagliptin)化学名称为：2-[6-3-氨基-哌啶-1-基]-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基]-4-氟-苄腈。其化学结构式如下：

在琥珀酸曲格列汀中我们发现了工艺杂质，A、N、O、V、W，结构式如下，在降解实验中发现了降解杂质P和R。以上杂质，即有关物质均会影响到药品的纯度和质量，因此需要建立合适的分析方法对杂质的含量加以控制。曲格列汀中潜在杂质的名称和化学结构信息如下：

中国专利申请(申请公布号CN 104237421 A)提供一种琥珀酸曲格列汀及其制剂的有关物质检测方法，采用二极管阵列检测器，该方法采用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为乙腈，且所述的磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为60∶40～85∶15，磷酸盐缓冲液的pH值为5.0～5.5，磷酸盐缓冲液的浓度为0.05～0.1mol/L，检测波长为278nm。但该方法存在以下问题：1.该专利中未给出任何已知杂质，无法判断该方法的适用性；2.该分析方法的波长参数设置为278nm，不能涵盖所有杂质，经过对各个已知杂质的光谱图分析，杂质P在278nm没有任何紫外吸收。以上问题表明，该分析方法无法保证对本品的质量控制。

发明内容

针对上述技术问题，本发明提供一种测定琥珀酸曲格列汀原料中有关物质的方法，所述方法采用高效液相色谱法，将样品溶液注入高效液相色谱仪，完成曲格列汀原料中有关物质的测定，色谱条件为：

色谱柱：以十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱；

流动相：流动相A与流动相B均为酸性水溶液与有机溶剂的混合溶液，流动相A的体积百分比与流动相B的体积百分比的和始终保持为100％，进行线性梯度洗脱；所述线性洗脱梯度如下：

进一步地，所述色谱柱为Kromasil公司的100-5C18色谱柱。

进一步地，所述流动相A为酸性水溶液与有机溶剂体积比为90∶10的混合溶液；流动相B为酸性水溶液与有机溶剂体积比为40∶60的混合溶液。

进一步地，所述酸性水溶液为三氟乙酸或高氯酸水溶液，并用碱调节溶液pH值至3.0，所述酸性水溶液中三氟乙酸或高氯酸的体积百分比为0.1％。

具体地，所述酸性水溶液优选为高氯酸水溶液。

进一步地，所述有机溶剂为甲醇或乙腈。

具体地，所述有机溶剂优选乙腈。

进一步地，所述流动相的流速为0.8ml/min～1.0ml/min；所述色谱柱的温度为35℃～40℃；所述方法还包括检测波长，所述检测波长为197nm～235nm。

具体地，所述流动相的流速优选1.0ml/min；所述色谱柱的温度优选40℃；所述检测波长优选224nm。

进一步地，所述方法还包括供试品溶液的制备：取琥珀酸曲格列汀原料药样品适量，用所述酸性水溶液溶解并稀释样品，配制成每1ml含琥珀酸曲格列汀0.5mg的样品溶液。

本发明所述的测定方法，可按照以下方法实现：

(1)取琥珀酸曲格列汀原料药样品适量，用0.1％高氯酸水溶液(pH3.0)溶解样品，配制成每1ml含琥珀酸曲格列汀0.5mg的样品溶液。

(2)设置流动相的流速为0.8ml/min～1.0ml/min，检测波长为197nm～235nm，色谱柱温度为35℃～40℃。

(3)取(1)的样品溶液10μl，注入液相色谱仪，完成琥珀酸曲格列汀原料药中有关物质的分离测定。其中：