[发明专利]高效液相色谱法测定罗汉果茶中山奈素含量的方法

说明书

技术领域

本发明提供一种检测罗汉果茶中山奈素含量的方法，具体地 说，是高效液相色谱法测定罗汉果茶中山奈素含量的方法；属于化 学检测技术领域。

背景技术

罗汉果茶是由罗汉果提取、加工制成的茶剂。经大量的临床试 验证明，罗汉果茶对于治疗急性支气管炎痰热壅肺所致咳嗽、痰 多、口干等症有良好效果，根据文献报道，罗汉果中除含葫芦烷类 化合物外，还得到了2种黄酮苷；由于黄酮类化合物具有消炎、强 心、降压、扩张冠状动脉、降低胆固醇、利尿、止咳祛痰、保肝等 作用，故通过测定罗汉果茶中黄酮类化合物的含量，达到控制产品 质量的目的，前人已对罗汉果鲜果中槲皮素含量进行了研究。

发明内容

针对上述不足，本发明的目的是提供一种提取、分析效率高， 检测结果重现好的高效液相色谱法测定罗汉果茶中山奈素含量的方 法。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：

一种高效液相色谱法测定罗汉果茶中山奈素含量的方法，其特征 在于，依次包括下述步骤；

1)取本品，精密称定，研细，按质量比1:10的比例用乙醚将 罗汉果茶超声处理15min，离心取下层沉淀，干燥；

2)在微波反应器中，取步骤1)得到的沉淀，加入沉淀质量5％ 的溴代1-烷基-3-甲基咪唑，沉淀质量4倍的70％乙醇，在65℃， 处理10min得到提取液；

3)将提取液浓缩后得到浓缩液，向浓缩液中加入等质量的大孔 树脂混合并搅拌均匀，干燥后上AB-8树脂，水洗至无色，再以乙醇 溶液淋洗，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩并干燥，得干粉；

4)称取步骤3)的干粉0.5g，加10％磷酸溶液5ml，置水浴加 热回流30分钟，放冷，定量转移至25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻 度，过0.22微米的滤膜，取上清液进行高效液相分析。

进一步的，上述的一种高效液相色谱法测定罗汉果茶中山奈素 含量的方法，所述的高效液相色谱法的参数如下：

色谱柱：InertsilODS-SP液相色谱柱，5μm，4.6×250mm；

柱温：30℃；

流速：2mL/min；

流动相：乙腈－0.5％醋酸，其体积比为：44:56

测波长：220nm。

与现有技术相比，本发明提供的采用离子液体为催化剂，避免 高温对有效成分的破坏；减少了提取的时间，节约了提取溶剂，利 用AB-8大孔树脂的富集和纯化，所得的产品纯度高，并且检测效 率高，重复性好，有利于提供控制产品的质量。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，对本发明的权利要求做进一步的详细 说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护 范围所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。

本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体 的均为体积浓度，溶质为固体的均为质量浓度。

实施例1

1)取本品，精密称定，研细，按质量比1:10的比例用乙醚将 罗汉果茶超声处理15min，离心取下层沉淀，干燥；

2)在微波反应器中，取步骤1)得到的沉淀，加入沉淀质量5％ 的溴代1-烷基-3-甲基咪唑，沉淀质量4倍的70％乙醇，在65℃， 处理10min得到提取液；

3)将提取液浓缩后得到浓缩液，向浓缩液中加入等质量的大孔 树脂混合并搅拌均匀，干燥后上AB-8树脂，水洗至无色，再以乙醇 溶液淋洗，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩并干燥，得干粉；

4)称取步骤3)的干粉0.5g，加10％磷酸溶液5ml，置水浴加 热回流30分钟，放冷，定量转移至25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻 度，过0.22微米的滤膜，取上清液进行高效液相分析。

进一步的，上述的一种高效液相色谱法测定罗汉果茶中山奈素 含量的方法，所述的高效液相色谱法的参数如下：

色谱柱：InertsilODS-SP液相色谱柱，5μm，4.6×250mm；

柱温：30℃；

流速：2mL/min；

流动相：乙腈－0.5％醋酸，其体积比为：44:56

测波长：220nm。

取经五氧化二磷减压干燥过夜的山奈素对照品适量，精密称 定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得对照品溶液。

分别吸取对照品溶液10μl、供试品溶液及阴性样品溶液各20 μl，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件记录色谱图，山奈素峰 的测定无干扰，山奈素的保留时间为12分钟左右，山奈素峰与相邻 近的蜂分离度良好。