[发明专利]一种蔬菜和干果中双炔酰菌胺残留量的LC‑MS‑MS检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种双炔酰菌胺残留量的检测方法，更具体地涉及一种蔬菜和干果中双炔酰菌胺残留量的LC-MS-MS（液相色谱-串联质谱）检测方法，属于农药残留量检测技术领域。

背景技术

双炔酰菌胺化学名称为2-(4-氯苯基)-N-[2-(3-甲氧基-4-丙-2-炔基氧基-苯基)-乙基]-2-丙-2-炔氧基-乙酰胺，英文化学名称为2-(4-chlorophenyl)-N-[2-(3-methoxy-4-prop-2-ynyloxy-phenyl) -ethyl]-2-prop-2-ynyloxy-acetamide。CAS登录号为[374726-62-2]。分子式：C23H22ClNO4，相对分子质量：411.9。化学结构式如下：

理化性质：淡棕色粉末，熔点96.4℃~97.3℃。沸点大约200℃开始热分解。蒸汽压<9.4×10-7 Pa(25℃)。油水分配系数log Pow：3.2℃(25℃)。水中溶解度4.2 mg/L(25℃)。哺乳动物毒性：大鼠急性经口LD5>5000 mg/kg，大鼠急性经口LD50>2000 mg/kg，大鼠急性吸入LC50> 5000 mg/kg，兔眼睛有轻微刺激，兔皮肤有中度刺激，通过大鼠试验无致突变、致畸、致癌作用，亦无神经毒害，对大鼠的繁殖无影响，大鼠体内代谢可快速吸收和排出。生态毒性：鸟类急性经口山齿鹑LD50>5000 mg/kg，虹鳟鱼LC50>2.9 mg/L。蜜蜂触杀和经口LD50>200 mg/只，蚯蚓LC50>1000mg/kg。环境降解效应：在pH4~9水溶液中稳定。水中光解DT50 1.7 d(pH=7，25℃)。土壤代谢Koc 847 mL/g(范围405~1294 mL/g)。土壤降解DT50 17 d(范围2~29 d)。

双炔酰菌胺对抑制孢子的萌发具有较高活性。它同时也抑制菌丝体的成长与孢子的形成，对靶标病原体，双炔酰菌胺最好是用作预防性喷洒，但在潜伏期中也可以提供治疗作用。双炔酰菌胺对植物表面的蜡质层具有很高的亲合力。当喷洒到植物表面且沉淀干燥后，大部分活性成分被腊质层吸附，并且很难被雨水冲洗掉。一小部分活性成分渗透到植物组织中，由于其本身活性高，被吸收到植物组织中的这部分足以抑制菌丝体的成长，从而保护整个叶片不受病害侵染。这些性质保证它稳定高效，持效期长，作用效果好，使用剂量低应用范围广。

随着人们对食品中农药残留毒性的关注，双炔酰菌胺残留的检测也受到重视。据美国联邦公报消息，2016年3月28日美国环保署发布条例，修订双炔酰菌胺（mandipropamid）的最大残留限量。土豆（湿皮）中限量小于0.15ppm；块茎和球茎类蔬菜(亚组1C) 限量小于0.09ppm。同时，作为我国主要出口市场的欧盟、日本等国家规定若田间使用农药没有在该国家登记，没有制定相应的残留限量标准时，出口至其国家的食品农产品包括畜禽肉等动物源性食品中残留限量均实行0.01mg/L 的“一律标准”。

我国最新颁布的GB2763—2014《食品中农药最大残留限量》规定了苯酰菌胺、氰酰胺、啶酰菌胺、氟吡菌胺、环酰菌胺、噻呋酰胺、双炔酰菌胺7种新型酰胺类杀菌剂在食品中的残留限量，而目前尚未有同时分析这7种新型杀菌剂残留分析方法的报道，因此建立果蔬中简单准确的新型酰胺类杀菌剂残留量分析方法已是迫在眉睫。

国内外公开报道的关于新型酰胺类杀菌剂分析手段主要有免疫分析法、气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法，其中目前报道较多的分析方法为气相色谱-质谱联用法。而利用液质联用方法在基质较为复杂的各种蔬菜和干果中检测多双炔酰菌胺残留，并且适应范围广、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的LC-MS-MS方法尚未见报道。

因此，一种简便、快速、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的双炔酰菌胺在蔬菜和干果中的残留检测方法亟待开发出来。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处，而提供一种简便、快速、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的蔬菜干果中双炔酰菌胺残留量的检测方法。

为实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种蔬菜干果中双炔酰菌胺残留量的LC-MS-MS（液相色谱-串联质谱）检测方法，包括如下步骤：

（1）试样制备：

将市场采集样品按照四分法缩分至500g，将此样品分成2×200g两份，用食品加工机粉碎，于-20℃冰柜密闭保存。