[发明专利]一种金刚烷胺分子印迹膜电化学传感器的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于分子检测技术领域，具体涉及一种金刚烷胺分子印迹膜电化学传感器的制备方法。

背景技术

金刚烷胺分子具有稳定的三环胺结构，在药理学上是一种谷氨酰胺受体拮抗剂，用于治疗流行性感冒和帕金森综合征。这种化合物可以通过阻断病毒复制周期中M2蛋白质子通道的活性来抑制病毒复制。近年来，随着世界范围内流感的爆发，养殖业对于金刚烷胺的依赖性增加，使得金刚烷胺的用量和使用范围被无序扩大，导致了一系列的负作用。比如抗药性，神经过敏，焦虑，梦魇，间歇性的幻觉。由于它对人类的潜在危害，从2005年开始，包括美国和中国在内的很多国家已经禁止将金刚烷胺用于家禽饲养中的抗流感药物。然而，这种抗病毒药物仍然被非法用于家禽饲养中的禽流感的治疗，特别是在中国的养鸡业中。因此，为了减少其对人类的潜在危害，建立一种简单，廉价，高灵敏性的方法来检测动物源性食品中金刚烷胺的残留是非常必要的。

现在，在动物源性食品中检测金刚烷胺的方法主要是仪器分析法和免疫分析法。仪器分析法的优点是准确度高，精确性好，但常常需要昂贵和复杂的仪器，样品预处理费时。基于酶和抗原抗体反应的分析方法具有高特异性和选择性的优点，但是由于酶和抗体的不稳定性，所以对检测环境的要求很高。本研究中，我们建议有效的结合仪器分析法和生物分析法的优点来建立一种简单，快速，特异性，廉价，现场分析，准确而且灵敏的方法来检测动物源性食品中的金刚烷胺残留。

电化学传感器具有微型化，低能量要求，低成本，高灵敏性和快速响应等优点，在药物残留检测领域已经引起了很大的关注。由于生物材料本身的特性，生物传感器具有不稳定的缺点，所以在传感器中选用合成的对应物来替代生物受体做为识别原件已经逐步的成为很多领域的研究焦点。分子印迹聚合物具有高的选择性和亲和力，广泛用于对应物的合成，其优点是化学和物理性质稳定，廉价，制备容易。使用电化学方法在电极表面沉积分子印迹聚合物具有很多优点，比如制备简单，膜的厚度可控，极高的重现性等。

目前用电沉积法制备金刚烷胺分子印迹膜传感器及其应用研究尚未见报道。

发明内容

有鉴于此，本发明首次使用电沉积分子印迹聚合物膜电化学传感器检测动物源性食品中金刚烷胺残留。本发明以邻氨基苯硫酚为功能单体，以金刚烷胺为模板，用电沉积法，构建了对金刚烷胺具有专一选择特性的分子印迹电化学传感器。该传感器提供了一种简单，快速，特异性，便宜和灵敏的电化学方法来检测动物源性食品中的金刚烷胺残留。为达到上述目的，本发明创造的技术方案是这样实现的：

一种金刚烷胺分子印迹膜电化学传感器的制备方法，所述电化学传感器包含工作电极、参比电极和对电极，所述工作电极的基底电极为金电极，参比电极为饱和氯化钾电极，对电极为铂丝电极，包括如下步骤：

(1)电极预处理；

(2)邻氨基苯硫酚自组装

将步骤(1)处理好的电极浸没于50mL电聚合溶液中，放置过夜，用于形成邻氨基苯硫酚自组装单分子层；

所述电聚合溶液包括50mmolL^-1邻氨基苯硫酚,10mmolL^-1金刚烷胺,5mmolL^-1四丁基高氯酸铵和10mmolL^-1盐酸；

(3)静电吸引

将单体自组装的金电极取出后，用乙醇小心淋洗，以去除金电极表面未结合牢固的邻氨基苯硫酚分子；再浸泡在上述的电聚合溶液中，于-0.8V下恒电位作用10min。

(4)电沉积

将恒电位处理后的金电极直接在上述的溶液中进行循环伏安扫描，电沉积形成聚邻氨基苯硫酚分子印迹聚合物；(5)模板分子的洗脱

首先，将电沉积有聚合物膜的修饰电极在HCl溶液中，于+0.8V恒电位作用10min，然后，再分别在甲醇和双蒸水中超声10min,以便去除模板分子。

进一步，所述电极预处理是金电极表面使用0.50μm的金砂纸和0.05μm的氧化铝小心抛光，然后浸没于“Piranha”溶液中(30％H₂O₂:98％H₂SO₄＝1:3,v/v)5min,接着用双蒸水清洗来去除其他的污染物；然后，将电极在0.05molL^-1H₂SO₄溶液中使用循环伏安法在-0.2V到+1.0V范围内扫描，直到获得稳定的电化学响应，然后在空气中干燥；