[发明专利]抑癌多肽127aa及其表达载体和应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及抑癌多肽127aa及其表达载体和应 用。

背景技术

卵巢癌在女性恶性肿瘤中死亡率居于第一位，其中最常见的晚期上皮性卵巢 癌5年生存率长期停留在20～30％左右，其主要原因是卵巢癌发病部位隐蔽，难 以早发现，早治疗，预后差。因此，加强治疗肿瘤的研究，探索新的治疗途径具 有十分重要的意义。多肽药物由于分子小、易合成、构效关系研究较容易、易被 改造以及针对性强和疗效明显等优势，得到了广泛的关注。近年来，随着生物技 术及多肽合成技术的不断改进，多肽药物的纯度高、毒副作用低、几乎没有免疫 原性且合成成本较低，产业化开发优势明显，故多肽药物的适应症广泛且疗效显 著，有广泛的应用市场。目前，世界范围内已有超过60多种多肽药物被批准上 市，另外有大量的多肽药物已进入或是完成临床研究，这预示着未来治疗类多肽 药物的市场供求会有巨大的提升。

在卵巢癌进展过程中，某些基因的表达发生变化，是卵巢癌发生发展的关键 基因，成为卵巢癌治疗的潜在靶点。羧基末端结合蛋白(C-terminal-bindingprot ein，CtBP)在进化上保守，能与多种转录因子相互作用，而主要发挥转录辅抑 制因子的功能。它最初是在对腺病毒癌基因E1A的研究中被发现，人基因组主 要编码CtBP1和CtBP2两种形式的分子，越来越多的研究表明，CtBP2能参与 多个肿瘤相关基因的转录调控，促进卵巢癌的发生发展。

Ink4编码区编码3个不同的细胞周期抑制因子：p16^Ink4a、p15^Ink4b和Ink4a/ Arf。p16^Ink4a和p15^Ink4b在Rb通路中抑制CDK4和CDK6而发挥作用。有相关报 道，E1A在人原代纤维母细胞和角化细胞中的表达引起p16^Ink4a表达显著增加。 在E1A的PLDLS突变的细胞(PLDLS突变的E1A不能与CtBP结合)中却未 发现E1A对p16^Ink4a表达的抑制作用，据此推测，E1A是通过与CtBP的C端P LDLS结合区域结合才发挥了该功能，而在卵巢癌中E1A是不是通过CtBP2C 端PLDLS结合区域抑制p16^Ink4a的表达还没有确切报道。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种抑癌多肽 127aa，具有抑制肿瘤生长和抑制肿瘤发生的抗肿瘤效应。本发明的另一目的是 提供一种上述抑癌多肽127aa的表达载体。本发明还有一目的是提供一种上述抑 癌多肽127aa的用途。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

一种抑癌多肽127aa，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。

所述的抑癌多肽127aa的编码基因，其核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。

含有所述的抑癌多肽127aa的编码基因的真核表达载体。

所述的真核表达载体，由SEQIDNO.2所示的核酸序列与pCMV-(DYKD DDDK)-N载体连接而成。

所述抑癌多肽127aa在制备用于抑制肿瘤细胞生长的药物中的应用。

有益效果：与现有技术相比，本发明利用生物工程技术，基于卵巢癌发生特 点和治疗难点，通过抗卵巢癌基因治疗途径发明一段重组多肽，经序列分析证明 重组成功后，将此真核表达重组多肽转染到肿瘤细胞，免疫印迹证明多肽的蛋白 表达，接着对多肽的抗肿瘤功能进行了研究，证明其独特的抑制肿瘤生长和抑制 肿瘤发生的抗肿瘤效应。多肽类药物具有分子量小，在人体内不结存，无副作用， 免疫原性小，活性好，易于穿透肿瘤细胞，且能以多种方式给药、易于多途径吸 收、不易产生耐药性等优点成为一个研究的热点。因此，发明为肿瘤治疗开发新 的靶点提供实验依据，对于应用于肿瘤的临床治疗具有十分重要的开发应用前 景。

附图说明

图1是质粒pCMV-(DYKDDDDK)-N的结构示意图；

图2是127aa多肽的PCR产物的琼脂糖电泳图；

图3是pCMV-(DYKDDDDK)-N载体和127aa多肽质粒酶切产物琼脂糖 电泳图；