[发明专利]一种布鲁氏菌Omp25蛋白抗原表位多肽及其应用

说明书

本发明公开一种布鲁氏菌Omp25蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明的多肽是：其氨基酸序列中含有SEQ ID N0.1，或SEQ ID N0.1所示的序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽，也可以是氨基酸序列为SEQ ID N0.1所示的序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。本发明的SEQ ID N0.1多肽可以构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。而本发明所涉及的各多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。本发明筛选多肽为化学合成，经刺激DC后可释放出高浓度的IL‑4，可作为目的抗原检测检测布鲁氏菌病感染的血清，或制备Omp25蛋白单克隆抗体的抗原。

技术领域

本发明涉及一种多肽，确切讲是一种布鲁氏菌Omp25蛋白抗原表位多肽及其应用。

背景技术

布鲁氏菌（Brucella)，革兰氏阴性兼性细胞内寄生菌，是严重的人兽共患病，广泛感染家畜、野生动物和人，家畜动物布鲁氏菌主要感染羊、牛和猪，其中对人致病的主要有马耳他布鲁氏菌和流产布鲁氏菌；布鲁氏菌病感染家畜引起公畜的附睾炎和怀孕家畜的流产、胎盘炎症和不育；对于人类，布鲁氏菌病课引起急性炎症和许多类似流感感染的症状，包括波浪热、多汗、背疼和体质虚弱，在一些病人身上，急性临床症状可持续一年以上最终导致慢性的持续性感染，慢性临床症状包括不规则的发热、关节疼、乏力，并发引起关节炎、区部末梢神经炎症、脊柱炎、骨髓炎和粘液囊炎，布鲁氏菌病的流行不仅危害着畜牧业的发展，造成了巨大的经济损失，而且严重威胁着人类的健康和公共卫生安全。

目前，全世界用于预防布鲁氏菌病的有效疫苗均为减毒的活疫苗，各种疫苗的使用不仅干扰着疫苗免疫和自然感染的鉴别诊断，而且所有的疫苗株不同程度的对人有致病毒力，甚至有些疫苗对人为强致病力，安全可靠的灭活疫苗研究效果差，不能起到免疫保护作用。基因工程疫苗的研究近几十年来一直被全世界研究人员所关注和努力，但由于布鲁氏菌本身免疫抗原多样化，结构复杂，未能发现可用于田间试验的疫苗抗原，寻找存在于各种布鲁氏菌种间保守存在且具有很好免疫功能的蛋白，研制预防保护力高的亚单位疫苗是解决这一问题的有效办法。

现有技术中大多数表达工具只能表达一种蛋白，而布鲁氏菌存在多种与免疫相关的蛋白，研究表明单个蛋白的表达不能形成有效的保护疫苗用抗原，表达制备多个防控作用的亚单位疫苗成本高，且组合成分复杂；而决定免疫蛋白功能的成分是位于蛋白上微小的抗原决定簇，对免疫相关蛋白免疫抗原表位的挖掘和鉴定，可以有效的提取布鲁氏菌中有效的免疫抗原成分，同时也对蛋白的结构和功能研究提供直接的指导，表位抗原成分的确定，可为检测、预防或治疗能提供良好的抗原组分。因此筛选获得免疫蛋白上这些抗原决定簇多肽为解决现有技术存在的不足提供了一种思路和途径。

发明内容

本发明提供一种布鲁氏菌Omp25蛋白抗原表位多肽及其应用 。

本发明的布鲁氏菌Omp25蛋白抗原表位多肽其氨基酸序列中含有SEQ ID NO.1。

本发明的布鲁氏菌Omp25蛋白抗原表位多肽也可以是其氨基酸序列为SEQ IDNO.1所示的序列经过一个或/和几个氨基酸残基的取代和/或缺失形成的序列形成的多肽，或者是SEQ ID NO.1所示的序列和添加有具有布鲁氏菌免疫源性功能的衍生的多肽。

由SEQ ID NO.1可构成的重组载体或表达盒或转基因细胞或重组菌。

本发明所述的多肽可在制备诊断或预防或治疗布鲁氏菌引起的疾病的试剂或药物中的应用。