[发明专利]一种牛奶中乳果糖的检测方法

权利要求书

1.一种牛奶中乳果糖的检测方法，包括：

(1)取牛奶样品用水稀释后，依次加入亚铁氰化钾溶液和硫酸锌溶液，静置，过滤，收集滤液；加入β-D-半乳糖苷酶，混匀后加盖，于50～60℃恒温培养1～2h；然后依次加入葡萄糖氧化酶、正辛醇、氢氧化钠溶液、过氧化氢和过氧化氢酶，于45～50℃恒温培养3～4h；冷却后定容，过滤，净化，收集滤液作为待测液；其中β-D-半乳糖苷酶、葡萄糖氧化酶、氢氧化钠溶液、过氧化氢、过氧化氢酶与滤液的体积比为0.1:0.1:0.5:0.05:0.1:5；

(2)采用具有安培检测器的离子色谱仪分析步骤(1)中的待测液，得到乳果糖的含量；其中离子色谱仪分析的条件为：

检测器：ED40电化学检测器，参比电极为Ag/AgCl、Au电极；

色谱柱：CarboPac PA10色谱分离柱；

流动相：超纯水；

流速：1.0mL/min；

淋洗液：10mmol/L KOH；

进样体积：25μL。

2.根据权利要求1所述的一种牛奶中乳果糖的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中的牛奶样品为鲜牛乳或牛奶的添加物。

3.根据权利要求1所述的一种牛奶中乳果糖的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中的亚铁氰化钾溶液的浓度为200g/L，与牛奶样品的体积比为1:5；硫酸锌溶液的浓度为200g/L，与牛奶样品的体积比为1:5。

4.根据权利要求1所述的一种牛奶中乳果糖的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中加入硫酸锌溶液后加入缓冲液调整溶液pH值至7.5；加入β-D-半乳糖苷酶恒温培养后加入缓冲液调整溶液pH值至7.6。

5.根据权利要求1所述的一种牛奶中乳果糖的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中的过滤采用0.45μm水相滤膜过滤；净化采用C18小柱净化。

6.根据权利要求1所述的一种牛奶中乳果糖的检测方法，其特征在于：所述色谱柱的规格为：长度250mm×内径4mm。

7.根据权利要求1所述的一种牛奶中乳果糖的检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中的乳果糖的含量采用外标法定量。