[发明专利]一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法在审
申请号: | 201610223240.7 | 申请日: | 2016-04-12 |
公开(公告)号: | CN105785022A | 公开(公告)日: | 2016-07-20 |
发明(设计)人: | 罗朝领;董敏;卢荣春 | 申请(专利权)人: | 上海凯璟生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/58 | 分类号: | G01N33/58;G01N33/577;G01N33/573;G01N33/558 |
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地址: | 201611 上海市松江区松*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 阿尔兹海默 综合症 mapkapk5 免疫 荧光 试剂盒 制备 方法 | ||
1.一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法,其特症在于,本试剂盒包括PVC底板、荧光结合垫、硝酸纤维素膜、样品垫和吸水垫;所述样品垫、荧光结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫按水平方向固定于PVC底板上;所述结荧光合垫上有包被的鼠抗人MAPKAPK5单克隆抗体1-纳米荧光微球复合物、鸡IgY-纳米荧光微球复合物;所述的硝酸纤维素膜上有鼠抗人MAPKAPK5单克隆抗体2构成的检测线和兔抗鸡IgY抗体构成的质控线。
2.如权利要求1所述的一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法,其特症在于,所述的纳米荧光微球为醛基化红荧光微球,纳米颗粒粒径为100~200nm,激发波长为365nm,发射波长为612±5nm,表面有醛基基团其含量为0.1~0.5mMol/g。
3.如权利要求1所述的一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法,其特症在于,鼠抗人MAPKAPK5单克隆抗体1和鼠抗人MAPKAPK5单克隆抗体2为MAPKAPK5特异性单抗,识别MAPKAPK5蛋白分子上的2种位点。
4.如权利要求1所述的一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法,其特症在于,将硝酸纤维素酶切成25mm×300mm,贴在PVC底板上;将兔抗鸡IgY用PBS稀释到浓度为1mg/ml,作为C线包被液;将鼠抗人MAPKAPK5单抗2用PBS稀释到浓度为1mg/ml,作为T线包被液;通过喷膜仪,将T线包被液和C线包被液在硝酸纤维素膜上划线得到检测线和质控线,37度烤干,即可得到单克隆抗体包被测试条。
5.如权利要求1所述的一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法,其特症在于纳米荧光微球颗粒与鼠抗人MAPKAPK5单抗或鸡IgY按照1:1(ul:ug)混合,37度反应2h,制备得到鼠抗人MAPKAPK5单克隆抗体1-纳米荧光微球复合物或鸡IgY-纳米荧光微球复合物。
6.如权利要求5所述的纳米荧光微球颗粒与鼠抗人MAPKAPK5单抗偶联方法是通过纳米荧光微球上的醛基与抗体蛋白上的氨基在弱碱环境下通过希夫氏碱基缩合,形成纳米荧光微球-CH-NH2-MAPKAPK5抗体复合物;同样方式形成纳米荧光微球-CH-NH2-鸡IgY抗体复合物。
7.如权利要求1所述的一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法,其特症在于结合垫的制备:将结合垫切成9mm×300mm细条,将鼠抗人MAPKAPK5单克隆抗体1-纳米荧光微球复合物或鸡IgY-纳米荧光微球复合物按照一定比例混合均匀铺在结合垫上,放入烘箱37度下烘烤2h。
8.如权利要求1所述的一种检测阿尔兹海默综合症MAPKAPK5的干式免疫荧光试剂盒和制备方法,其特症在于检测样品为血清、血浆、全血、脑脊液、尿液。
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