[发明专利]基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法

说明书

本发明公开了一种基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法，该方法包括：向双金属纳米团簇溶液中加入可能含有半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的待测样品、柠檬酸钠、双氧水和TMB，经混合反应后，通过观测所形成的混合反应体系在可见光波段的吸光值，实现对待测样品中的半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的检测；所述双金属纳米团簇为DNA‑Ag/Pt纳米团簇。本发明基于DNA‑Ag/Pt纳米团簇溶液模拟过氧化物酶比色检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸，其检测的线性范围为5.0‑500nM，灵敏度可达到2.0nM，具有简便快速、成本低，稳定性高等优点，可应用于血清等生物样品中半胱氨酸或乙酰半胱氨酸药品的检测。

技术领域

本发明涉及一种基于双金属纳米团簇形成的检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法，特别涉及一种利用单链核酸制备双金属纳米团簇并将之应用于半胱氨酸或乙酰半胱氨酸检测的方法，属于纳米科技领域。

背景技术

酶是一类具有催化功能的蛋白质或核酸，可以在适宜的环境中催化化学反应。但是，酶属于生物催化剂，所需要催化的条件比较严格，而且需要较高成本，限制了它们的应用。因此，开发一种具有类似催化活性的模拟酶尤为重要。

纳米模拟酶是一类非蛋白结构，但与天然酶有相似催化性能的人工合成催化剂，除了具有催化稳定性高、制备容易、价格低廉、生产规模化等优点，还能在室温下保存稳定，易于修饰和标记各类功能分子或是蛋白抗体的优点，引起了研究人员的广泛关注。自从2007年中国科学院生物物理研究所高利增等报道四氧化三铁纳米颗粒具有过氧化物酶样模拟活性以来，大量的纳米材料被报道具有过氧化物酶活性。在单金属纳米材料中引入第二种金属会对催化剂的整体的催化活性以及选择性发生变化，因此双金属纳米材料也逐渐成为人们关注的焦点。纳米模拟酶与外界特定分子的选择性作用，可诱导其催化活性的选择性和灵敏的变化。基于纳米模拟酶的特性，开发纳米模拟酶传感方法具有很高的应用前景。

半胱氨酸和乙酰半胱氨酸的检测对于临床诊断和药物质量控制具有重要的价值。因此，如何提供一种将纳米模拟酶应用于半胱氨酸和乙酰半胱氨酸的检测，已经成为业界研发人员的重要研究方向。

发明内容

针对上述现有技术中的不足，本发明的主要目的在于提供一种基于双金属纳米团簇形成的检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法，其能方便快速、低成本、高灵敏、高稳定性的实现半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的比色检测。

为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：

一种基于双金属纳米团簇检测半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的方法包括：向双金属纳米团簇溶液中加入可能含有半胱氨酸或乙酰半胱氨酸的待测样品、柠檬酸钠、双氧水和3,3',5,5'-四甲基联苯胺，经混合反应后，通过观测所形成的混合反应体系在可见光波段的吸光值，实现对待测样品中的半胱氨酸的检测；所述双金属纳米团簇为DNA-Ag/Pt纳米团簇。

进一步的，该方法包括：

向DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液中加入柠檬酸钠缓冲溶液、双氧水、3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液和一系列不同浓度的标准半胱氨酸溶液或乙酰半胱氨酸溶液并混合反应，测定所获混合反应体系在可见光波段的吸光值，建立半胱氨酸或乙酰半胱氨酸浓度-吸光值标准曲线；

向DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液中加入柠檬酸钠缓冲溶液、双氧水、3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液和待测样品并混合反应，测定所获混合反应体系在可见光波段的吸光值，并与所述标准曲线比对，从而测得待测样品中的半胱氨酸或乙酰半胱氨酸浓度。

作为优选方案之一，所述DNA-Ag/Pt纳米团簇粒径在3.0nm～6.0nm。

作为优选方案之一，所述DNA-Ag/Pt纳米团簇的Ag与Pt的质量比为1：10～1:30。

作为优选方案之一，所述DNA-Ag/Pt纳米团簇溶液的浓度为0.1μM～2.0μM。