[发明专利]布鲁氏菌104M疫苗株敲除Omp25基因的重组菌及应用

权利要求书

1.重组菌，为降低和/或抑制布鲁氏菌104M中Omp25蛋白活性得到的菌。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述降低和/或抑制布鲁氏菌104M中Omp25蛋白活性为抑制或沉默布鲁氏菌104M中Omp25蛋白编码基因的表达。

3.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于：所述抑制或沉默布鲁氏菌104M中Omp25蛋白编码基因的表达为敲除布鲁氏菌104M中Omp25蛋白编码基因。

4.根据权利要求3所述的重组菌，其特征在于：所述敲除布鲁氏菌104M中Omp25蛋白编码基因为将布鲁氏菌104M中Omp25蛋白编码基因替换为抗性基因。

5.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述布鲁氏菌104M中Omp25蛋白编码基因替换为抗性基因均采用基因组定点编辑或同源重组的方式进行；

所述同源重组具体为λ-red同源重组或sacB基因介导筛选的同源重组或自杀质粒介导的同源重组。

6.根据权利要求4或5所述的重组菌，其特征在于：所述布鲁氏菌104M中Omp25蛋白编码基因替换为抗性基因为将含有抗性基因的同源重组片段导入布鲁氏菌104M中；

所述含有抗性基因的同源重组片段包括Omp25蛋白编码基因上游同源臂、抗性基因和Omp25蛋白编码基因下游同源臂。

7.根据权利要求6所述的重组菌，其特征在于：所述含有抗性基因的同源重组片段通过重组载体导入布鲁氏菌104M中；

所述重组载体为将含有抗性基因的同源重组片段插入表达载体得到的载体。

8.根据权利要求6或7所述的重组菌，其特征在于：

所述抗性基因为kan；

所述含有所述抗性基因的同源重组片段的核苷酸序列为序列1。

9.权利要求1-8中任一所述的重组菌在制备如下1)-6)中任一种产品中的应用：

1)、布鲁氏菌减毒疫苗；

2)、布鲁氏菌疫苗；

3)、促进淋巴细胞增值产品；

4)、促进CD3+、CD4+和/或CD8+细胞增值产品；

5)、提高CD4+细胞与CD8+细胞的数量比产品；

6)、降低细胞因子IL-2、IL-4和/或INF-γ的含量产品。

10.一种如下1)-6)中任一种产品，其活性成分为权利要求1-8中任一所述的重组菌；

1)、布鲁氏菌减毒疫苗；

2)、布鲁氏菌疫苗；

3)、促进淋巴细胞增值产品；

4)、促进CD3+、CD4+和/或CD8+细胞增加产品；

5)、提高CD4+细胞与CD8+细胞的数量比产品；

6)、降低细胞因子IL-2、IL-4和/或INF-γ的含量产品。