[发明专利]一种同时测定舒血宁中黄酮类化合物和萜内酯类化合物含量的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物检测领域，更具体地说，本发明涉及一种同时测定舒血宁注射液中黄酮类化合物和萜内酯类化合物含量的高效液相色谱检测方法。

背景技术

舒血宁注射液在临床用于心血管病及周围循环障碍性疾病的治疗，是通过多靶点多环节起作用的。它可以降低高同型半胱氨酸(Hcy)带来的心血管风险；降低与动脉粥样硬化发生、演变和发展有关的促炎因子血浆C反应蛋白(CRP)；降低具有强烈的收缩血管和促进血小板聚集的血栓素B2(TXB2)；降低对细胞及细胞膜的结构和功能可造成种种损伤的血清过氧化脂质(LOP)；降低广泛存在于各种组织和细胞中内源性缩血管活性物质内皮素(ET)；降低作为血小板和内皮细胞活化程度的血液测定指标P选择素(P-s)；降低参与动脉粥样硬化的初始、发展、斑块糜烂、破裂及血栓并发症全过程的可溶性血管外周血粒细胞表面粘附分子(CDlla)；降低应激状态下增高的神经内分泌激素(ACTH、ET、CORT、TXB2、PGI2)，避免血管损伤加重；降低增高的血液流变学指标；降低病理损伤时升高的血浆脑钠肽(BNP)；降低促使神经细胞、血管平滑肌细胞发生凋亡，在细胞凋亡与细胞生存调节中发挥极其重要作用的糖原合成酶激酶3β；阻止白细胞的活化，抑制白细胞变形性的下降及黏附性的增加而减轻脑缺血后脑损伤；降低影响细胞顺利吸收营养、氧气、削弱细胞正常功能的蕴粤；降低引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合，且具有细胞毒性的丙二醛(MDA)。同时，能提高患者体内消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，源于生命体的活性物质—SOD；升高能舒张血管，抑制血小板黏附聚集、清除自由基、维持正常的心排血量，具有细胞保护作用的一氧化氮。

舒血宁注射液的活性成分为银杏叶提取物，其有效成分主要为黄酮苷类和萜类内酯活性物质，舒血宁质量控制方法普遍是测定这两类成分的含量。王京辉等提供了一种舒血宁注射液、银杏叶提取物及银杏叶指纹图谱(药物分析杂志，2008，28(7)1026～1030页)；周欣等提供了一种银杏叶片剂中银杏黄酮的HPLC指纹图谱(中国药学杂志，2005年1月第40卷第2期，93～95页)；帅丽英等提供了一种银杏叶提取物的HPLC/UV指纹图谱(中国医药导报，2011年5月第8卷第15期，55～57页)等。上述指纹图谱可以对银杏叶提取物或银杏提取物相关制剂的质量控制起到一定作用。但是指纹图谱的缺点是无法定量的评价其有效成分的含量。

CN104034826提供了一种使用高效液相色谱-蒸发光散射检测器检测银杏叶萜类内酯的方法，采用该方法可以同时检测4种萜类内酯；刘会等公开了一种以HPLC-UV法测定银杏叶提取物中3个黄酮醇苷含量，并以HPLC-ELSD法测定4个萜类内酯含量的方法(中华中医药杂志(原中国医药学报)2015年2月第30卷第2期，第598～601页)。上述方法是采用不同的检测方法分别检测萜类内酯和黄酮醇苷，缺点是需要采用不同的仪器、不同的样品处理条件分别进样，从而导致操作步骤繁杂，工艺简便性不足。

崔大明等公开了一种采用RP-HPLC测定银杏叶提取物类脂质体中的3种银杏黄酮苷(槲皮素、山奈素、异鼠李素)以及4种萜类内酯(银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯)含量的方法(吉林农业大学学报，2013，35(4):446～449，462)；任艳平等公开了一种采用HPLC－MS同时测定舒血宁注射液中银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)、银杏内酯C(GC)、白果内酯、(BB)以及槲皮素(QCT)、异鼠李素(ISR)和山柰酚(KAE)等7个成分含量的方法(药物分析杂志，2013，33(2)第220～224页)。上述方法与指纹图谱方法相比，可以检测并标定有效成分含量，能够更好的控制产品质量。另外，由于可以同时检测黄酮苷和萜类内酯，大大简化了操作流程。

为了更好地控制舒血宁注射液的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地，需要不断研究和摸索更有利于产品质量检测、明确具体有效成分种类和含量的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种采用双检测器的高效液相色谱法同时测定舒血宁注射液中8种黄酮类化合物和3萜内酯类化合物含量的检测方法。使用这种方法，可以更好的控制制剂的质量，保证用药的安全性，能够更好地指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使消费者能够全面认识产品质地。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：