[发明专利]一种microRNA-129-5p的检测试剂盒和检测方法在审

专利信息
申请号: 201610192472.0 申请日: 2016-03-30
公开(公告)号: CN105647919A 公开(公告)日: 2016-06-08
发明(设计)人: 罗凤鸣 申请(专利权)人: 四川大学华西医院
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/68
代理公司: 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 代理人: 李高峡;张娟
地址: 610041 四*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 microrna 129 检测 试剂盒 方法
【说明书】:

技术领域

发明涉及一种microRNA的检测技术,特别是microRNA-129-5p的检测试剂盒和 检测方法。

背景技术

肿瘤的诊断主要依靠病理学、影像学及血清学证据,而目前常用的肿瘤标志物在 敏感度、特异性、费用方面存在一些不足,而近年来学者们对miRNA的深入研究为肿瘤诊断 提供了新的切入点。研究发现,microRNA-129-5p的表达水平与肿瘤相关,可用于肿瘤的诊 断。

然而,目前通过PCR检测microRNA-129-5p的表达水平的方法存在扩增效率低、出 现非特异性产物几率较高等问题,大大影响结果的真实性和可靠性。

发明内容

为了解决上述问题,本发明提供了一种新的microRNA-129-5p的检测试剂盒和检 测方法。

本发明提供了SEQIDNO:1~3所示的引物。

本发明还提供了SEQIDNO:1~2所示的引物在制备检测microRNA-129-5p的试剂 中的用途。

所述试剂还包括SEQIDNO:3所示引物。

本发明还提供了一种检测microRNA-129-5p的试剂盒,包含序列如SEQIDNO:1~ 2所示的引物。

所述试剂盒还包括SEQIDNO:3所示引物。

本发明还提供了一种检检测血浆中microRNA-129-5p含量的方法,包括如下步骤:

a,提取样本RNA:提取待检样本中的RNA;

b,基因扩增:用前述的试剂盒对待检样本中的RNA进行逆转录和PCR扩增;

c,结果检测:对扩增结果进行检测。

综上,本发明检测试剂盒和检测方法可以有效检测microRNA-129-5p,特异性强、 扩增效率高、灵敏度高、稳定性好,检测快速,可用于肿瘤检查,具有良好的应用前景。

以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容作进一步的详细说 明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明权利要 求书记载的内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1肺癌患者血浆1中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图2肺癌患者血浆1中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图3肺癌患者血浆2中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图4肺癌患者血浆2中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图5肺癌患者血浆3中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图6肺癌患者血浆3中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图7肺癌患者血浆4中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图8肺癌患者血浆4中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图9正常人血浆1中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图10正常人血浆1中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图11正常人血浆2中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图12正常人血浆2中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图13肺癌组织1中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图14肺癌组织1中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图15正常组织1中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图16正常组织15中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图17肺癌组织2中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图18肺癌组织2中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图19正常组织2中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图20正常组织2中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图21肺癌组织3中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图22肺癌组织3中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

图23正常组织3中microRNA-129-5p含量的扩增曲线

图24正常组织3中microRNA-129-5p含量的熔解曲线

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