[发明专利]心肌梗死易感基因的rs7832767位点多态性的检测方法和检测试剂盒

权利要求书

1.一种心肌梗死易感基因的rs7832767位点多态性的检测方法，其特征在于检测SFRP1基因的rs7832767位点的基因型，rs7832767带有T基因型的个体心肌梗死的发病风险显著高于普通人群。

2.根据权利要求1所述的心肌梗死易感基因的rs7832767位点多态性的检测方法，其特征在于rs7832767位点位于SFRP1基因内含子1内，SFRP1基因的核苷酸序列具有SEQIDNO:1所示的序列。

3.根据权利要求1或2所述的心肌梗死易感基因的rs7832767位点多态性的检测方法，其特征在于按下述步骤进行：第一步，按待检测人每例采集2ml血样标本计采集血样标本，从血样标本中抽提基因组DNA50ng为模板，加入2×PowerTaqPCRMasterMix25μl、10μmol/L的正向引物和反向引物各1μl，然后加入灭菌超纯水补足50μl，在95℃预变性5min后，再进行35个如下循环扩增：95℃变性30s，51℃退火30s，72℃延伸45s，最后72℃延伸10min，扩增后得到PCR扩增产物；第二步，取PCR扩增产物10μl，加入1单位内切酶、酶切缓冲液1μl和9μl灭菌超纯水后进行酶切；第三步，酶切后进行琼脂糖凝胶电泳，检测产物中单核苷酸多态性位点rs7832767的基因型。

4.根据权利要求3所述的心肌梗死易感基因的rs7832767位点多态性的检测方法，其特征在于心肌梗死易感基因的检测方法按下述步骤进行：第一步，按待检测人每例采集2ml血样标本计采集血样标本，从血样标本中抽提基因组DNA50ng为模板，加入2×PowerTaqPCRMasterMix25μl、10μmol/L的正向引物和反向引物各1μl，然后加入灭菌超纯水补足50μl，在95℃预变性5min后，再进行35个如下循环扩增：95℃变性30s，51℃退火30s，72℃延伸45s，最后72℃延伸10min，扩增后得到PCR扩增产物；第二步，取PCR扩增产物10μl，加入1单位内切酶、酶切缓冲液1μl和9μl灭菌超纯水后进行酶切；第三步，酶切后进行琼脂糖凝胶电泳，检测产物中单核苷酸多态性位点rs7832767的基因型。

5.根据权利要求3所述的心肌梗死易感基因的rs7832767位点多态性的检测方法，其特征在于正向引物碱基序列：

5’-GAGTTCCACCCTCAATCTGT-3’

反向引物碱基序列：

5’-TTCCAGGGATGGTCTGTTAT-3’。

6.根据权利要求4所述的心肌梗死易感基因的rs7832767位点多态性的检测方法，其特征在于正向引物碱基序列：

5’-GAGTTCCACCCTCAATCTGT-3’

反向引物碱基序列：

5’-TTCCAGGGATGGTCTGTTAT-3’。

7.根据权利要求3所述的心肌梗死易感基因的rs7832767位点多态性的检测方法，其特征在于内切酶为限制性内切酶TfiI。

8.根据权利要求4或5或6所述的心肌梗死易感基因的rs7832767位点多态性的检测方法，其特征在于内切酶为限制性内切酶TfiI。

9.一种检测心肌梗死易感基因的检测试剂盒，其特征在于包括特异性扩增SFRP1基因内含子1内rs7832767位点区域的10μmol/L的正向引物1μl和10μmol/L的反向引物1μl、2×PowerTaqPCRMasterMix25μl、1单位限制性内切酶TfiI和1μl酶切缓冲液。

10.根据权利要求9所述的检测试剂盒，其特征在于正向引物碱基序列：

5’-GAGTTCCACCCTCAATCTGT-3’

反向引物碱基序列：

5’-TTCCAGGGATGGTCTGTTAT-3’。