[发明专利]一种循环肿瘤细胞分离设备、系统及方法在审
| 申请号: | 201610190332.X | 申请日: | 2016-03-30 | 
| 公开(公告)号: | CN107287107A | 公开(公告)日: | 2017-10-24 | 
| 发明(设计)人: | 亓立峰 | 申请(专利权)人: | 无锡纳奥生物医药有限公司 | 
| 主分类号: | C12M1/36 | 分类号: | C12M1/36;C12M1/02;C12M1/00;C12N5/09 | 
| 代理公司: | 杭州千克知识产权代理有限公司33246 | 代理人: | 赵芳,冷红梅 | 
| 地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 循环 肿瘤 细胞 分离 设备 系统 方法 | ||
1.一种循环肿瘤细胞自动化分离设备,由进样装置、分离装置、收集装置和控制装置组成,其特征在于:所述进样装置由多个由蠕动泵控制的进样针和搅拌棒组成,所述分离装置由磁铁模块和分离器模块组成,所述分离器模块由多个单通道微流控芯片组成,所述微流控芯片为螺旋形通道,通道宽度为100~1000微米,高度为50~200微米,长度为10~100厘米,所述微流控芯片设置有1个进样口和2~3个出样口,进样口与进样装置的进样针连通,出样口分别与循环肿瘤细胞管道和细胞废液管道连通;所述收集装置通过循环肿瘤细胞管道与分离装置连通;所述控制装置为计算机或单片机,设置有控制屏和控制板。
2.如权利要求1所述的设备,其特征在于所述微流控芯片由上层 PDMS、PMMA聚合物芯片和下层的玻片或者硅片载体封接而成,或者由PC材质塑料注塑而成。
3.如权利要求2所述的微流控芯片,其特征在于芯片通道内侧由两亲性聚合物(如PEG-PCL,PCL-PEG,PCL-PLA-PEG, PMAL等)通过疏水作用涂层修饰。
4.一种循环肿瘤细胞分离方法,所述方法包括:
待测血液样品经抗凝处理或红细胞裂解处理后,加入样品管中与抗CD45免疫磁微粒预孵育,得到细胞悬液;
样品管细胞悬液中加入稀释液,搅拌混合15~20分钟后,启动磁铁模块将磁微粒吸附到样品管壁,抽取样品管中的样本液以0.5~5 ml/min流速进入单通道微流控芯片中进行分离;所述微流控芯片为螺旋形通道,通道宽度为100~1000微米,高度为50~200微米,长度为10~100厘米;
于单通道微流控芯片出样口获得循环肿瘤细胞细胞悬液。
5. 如权利要求1所述的方法,其特征在于所述步骤(1)为:待测血液样品经红细胞裂解处理后,1500rpm离心去除裂解红细胞,重新分散于50ml样品管中,每样品管内加有5ml含有0.1~1%BSA、1~5 mM EDTA的PBS,pH7.5,同时每管加入100 ~500µ1 1 mg/ml免疫磁微粒。
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