[发明专利]一种猴头菇蛋白肽-硒螯合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种猴头菇蛋白肽-硒螯合物的制备方法，属于食品生物技术领域。

背景技术

硒（Se）是人体必需的一种重要矿质元素，具有重要的生理功能，已有的大量研究表明很多种疾病都与硒营养状况密切相关。人体主要是通过饮食获得硒，人工补硒的方法是口服含硒制剂。一般补硒的方法是用无机硒化合物（亚硒酸钠和硒酸钠）制成口服制剂。但是，无机硒强化剂吸收和利用的效果不理想，生物有效性低，而且具有较强的毒副作用，最低致死量相对较小，中毒量与需要量之间范围小，存在较大的安全隐患，因而被严格限制其使用。研究显示，无机硒经生物转化后的有机硒化合物毒性低，吸收率更高，生物利用率和生物活性也更高，在激发免疫反应上比无机硒显著。

猴头菇，又叫猴头菌，因外形酷似猴头而得名。猴头菇的营养成分很高，干品中每百克含蛋白质26.3克，含有氨基酸多达17种，其中人体所需的占8种，氨基酸种类丰富，比例合理，且含有一些其他食品所少见的稀有氨基酸，因而猴头菇蛋白水解产生的多肽与普通动植物蛋白相比具有更丰富的生物活性。

利用生物技术对猴头菇进行蛋白质资源的深加工，进行生物活性肽的筛选和提取分离，然后利用无机硒进行螯合，制备多肽-硒螯合物，将无机硒转变成有机硒。这种猴头菇生物活性多肽-硒螯合物能显著提高硒元素的吸收率和利用率，而且还具有抗氧化、抗菌、免疫调节、降血脂和降血糖等活性，有很高的开发价值和应用前景，同时能提高猴头菇的附加值，为食药用菌资源的利用开辟了新的途径，具有广阔的市场前景。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术存在的缺陷，提供一种猴头菇蛋白肽-硒螯合物的制备方法，采用碱溶酸沉法或硫酸铵沉降法提取猴头菇中的蛋白提取率高，提取率达80.55%~85.75%，制备的猴头菇蛋白肽-硒螯合物中硒含量为2561~3818μg/g，为开发有机硒营养补充剂与功能性食品提供理论依据和技术支持。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的猴头菇蛋白肽-硒螯合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）猴头菇蛋白提取：利用碱溶酸沉法或硫酸铵沉降法提取猴头菇中的蛋白质；

（2）酶解：采用蛋白酶对步骤（1）得到的猴头菇蛋白进行有限酶解，灭酶，制备猴头菇蛋白多肽复合物溶液；

（3）多肽-硒螯合物制备：采用固体高温混合法或者液体螯合法使无机物亚硒酸钠中的硒与猴头菇蛋白肽进行螯合，制备猴头菇蛋白肽-硒螯合物；

（4）将步骤（3）得到的猴头菇蛋白肽-硒螯合物进行冷冻干燥。

步骤（1）中，碱溶酸沉法的具体操作如下：将猴头菇超微粉碎，将粉碎后的猴头菇与蒸馏水以w/v为1:20-80的比例混合，利用1.0%-5.0wt%NaOH调节pH至9.0-11.0，超声提取20-60min，超声功率为100-200W，随后水浴提取60-90min，温度50-100℃，提取后用纱布过滤，滤液为碱提的猴头菇蛋白溶液，用盐酸调节碱提的猴头菇蛋白溶液pH至2.0-4.0进行蛋白沉淀，离心得沉淀蛋白，水洗至中性再次离心，将沉淀冷冻干燥即得猴头菇蛋白；硫酸铵沉降法的具体操作如下：将猴头菇超微粉碎，将粉碎后的猴头菇与蒸馏水以w/v为1:20-60的比例混合，逐步加入固体硫酸铵使硫酸铵的饱和度达40-60wt%，离心得猴头菇蛋白沉淀，利用透析法脱盐后冷冻干燥得猴头菇蛋白；所述离心沉淀蛋白的离心条件为4000-5000r/min，离心5-10min。

步骤（2）中，将步骤（1）得到的猴头菇蛋白溶解在水中使蛋白质量浓度达1.0-5.0wt%，将pH调节到7.0-10.0，温度保持在40-60℃，加入1.0-5.0wt%蛋白酶，水解30-120min，灭酶，得到猴头菇蛋白多肽复合物溶液；所述蛋白酶采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶中的一种。