[发明专利]ITS序列作为DNA条形码在鉴定嘉兴槜李中的应用及鉴定方法有效
| 申请号： | 201610186877.3 | 申请日： | 2016-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN105671185B | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 李军;李白;李斌 | 申请（专利权）人： | 浙江省嘉兴市农业科学研究院（所） |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈自军 |
| 地址： | 314016 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | its 序列 作为 dna 条形码 鉴定 嘉兴 中的 应用 方法 | ||
【权利要求书】：
1.ITS序列作为DNA条形码在鉴定嘉兴槜李中的应用，所述ITS序列的碱基序列如SEQID NO.1或SEQ ID NO.2所示。
2.ITS序列作为DNA条形码在制备鉴定嘉兴槜李试剂盒中的应用，所述ITS序列的碱基序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。
3.一种鉴定嘉兴槜李的方法，包括以下步骤：
利用PCR扩增待测样品的ITS序列并进行测序，如果ITS序列的165bp碱基为“T”、195bp碱基为“T”，则判定待测样品为嘉兴槜李；
所述PCR扩增的引物对为：
上游引物：5’-GCCTAGCAGAACGACCCGAG-3’，
下游引物：5’-GACGTGTGACGCCCAGGCA-3’；
所述PCR扩增的反应体系为：
10×PCR缓冲液，2μL；dNTP混合液，0.5μL；10μM上游引物，0.5μL；10μM下游引物，0.5μL；样品DNA，1μL；Taq DNA聚合酶，0.2μL；补充无菌水至20μL；
所述PCR扩增的反应条件为：
94℃预变性5min；94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸30s，共36个循环；72℃延伸10min；4℃保温5min。
4.一种鉴定嘉兴槜李的DNA条形码，其特征在于，碱基序列如SEQ ID NO.1或SEQ IDNO.2所示。
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