[发明专利]一种快速检测肿瘤相关小肽MUC1的方法有效
| 申请号： | 201610184950.3 | 申请日： | 2016-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN105784658B | 公开（公告）日： | 2019-02-15 |
| 发明（设计）人： | 于京华;马超;刘海云;颜梅;葛慎光;张彦;李丽;田甜 | 申请（专利权）人： | 济南大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 | 代理人： | 李茜 |
| 地址： | 250022 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 肿瘤 相关 muc1 方法 | ||
1.一种适配体序列在制备小肽MUC1快速检测试剂中的应用，其特征是包括以下步骤：
（1）探针预变性
首先，羧基荧光素FAM标记的发卡探针1、发卡探针2，适配体在95 ºC下分别孵育0.5 h；将这三种溶液在室温条件下放置1 h；其中羧基荧光素FAM标记的发卡探针1，序列为AGTAGGTTGTATAGTTCAAAGTAACTATACAACCTACTACCTCA；羧基荧光素FAM标记的发卡探针2，序列为ACTTTGAACTATACAACCTACTTGAGGTAGTAGGTTGTATAGTT；适配体，英文名称为aptamer，序列为TGAGGTAGTAGGTTGTATAGTTGCAGTTGATCCTTTGGATACCCTGGAACTATACAACCTACTACCTCA；
（2）混合反应
以下步骤进行的总反应混合液体积为200 µL，不同浓度的粘蛋白MUC1与一定浓度的发卡探针1和发卡探针2以及浓度为5 nM的适配体混合于缓冲溶液中，混合溶液在25 ºC下反应1 h；
缓冲溶液的成分为浓度为0.75 M的氯化钠和50 mM的磷酸氢二钠，pH值为7.4；
（3）背景猝灭
向所述步骤（ 2 ） 中得到的混合溶液加入浓度为0.5 mg/mL氧化石墨烯溶液，室温下孵育0.5 h；
（4）荧光检测
荧光检测的实验参数如下：激发波长为480 nm，发射波长范围为500-650 nm。
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